[发明专利]白介素-12注射液纯度的检测方法

说明书

本发明提出一种白介素‑12注射液纯度的检测方法，属于医学检验和药物分析领域。本发明提供的检测方法主要包括了待测样品制备、流动相配制、色谱检测等步骤，通过优化流动相配比、调整待测样品上样方式、调整检测时间、检测波长和柱温等条件，进一步提高了检测的专属性、检测限和耐用性，采用该方法也能得到精确度更高、更为可靠的检测数据。本发明提供的检测方法在医学检验和药物分析领域具有十分广阔的应用前景，具有较大的实际应用价值。

技术领域

本发明属于医学检验和药物分析领域，尤其涉及一种白介素-12注射液纯度的检测方法。

背景技术

白介素-12注射液是一种具有广泛生物学活性的细胞生长因子，属于生物药物。生物药物通常有稳定性差等的缺陷，因此其注射液的纯度是需要重点关注的质量指标之一。

反相高效液相色谱的固相载体具有疏水性，可以根据流动相中被分离物质疏水性的不同而发生强弱不同的相互作用，从而使不同分子在反相柱中彼此分离。但采用上述的反相高效液相色谱法测定人白介素-12的纯度时，存在检测的专属性、检测限、精密度等方面仍存在缺陷，尚未取得理想的研究成果，因此研究出一种专属性、检测限、精密度高的人白介素-12注射液纯度的检测方法是本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明针对现有技术存在的专属性、检测限、精密度等方面的缺陷，提出一种适用于白介素-12的纯度检测方法，同时该方法还兼具精密度高、数据可靠等特点。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

本发明提供了一种白介素-12注射液纯度的检测方法，所述方法的流动相及色谱条件为：

流动相条件为：包括流动相A和流动相B，所述流动相A为0.05％的三氟乙酸水溶液，所述流动相B为0.05％的三氟乙酸乙腈溶液；

色谱条件为：色谱柱为YMC C4液相色谱柱，250mm×4.6mm I.D.S-5μm；

洗脱时间及所述洗脱时间内所述流动相B的体积含量如下：

0-5min，20％；5-25min，20～70％；25-26min，70～100％；26-35min，100～100％；35-35.5min，100～20％；35.5-40min，20～20％；

所述流动相A和流动相B的流速为0.9～1.1ml/min；

所述色谱柱的柱温为25-30℃；

检测波长为280-300nm。

作为优选，所述待测样品的浓度为6～20μg/ml，更优选地，所述待测样品的浓度优选为15μg/ml。

作为优选，所述待测样品的上样量为100～1000μl。

作为优选，所述流动相配置的方法具体为：

流动相A：用移液枪吸取三氟乙酸0.5mL至1L容量瓶中，加水定容后，静置处理后，上机检测，所述静置处理时长≥5min；

流动相B：用移液枪吸取三氟乙酸0.5mL至1L容量瓶中，加乙腈定容后，进行超声处理脱气，备用；

所述超声处理脱气时长为≥20min。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：

本发明提供的检测方法通过调整流动相配比、待测样品上样方式、检测时间、检测波长和柱温等条件，意料之外地发现提高了检测的专属性、检测限和耐用性，同时采用该检测方法进行纯度分析能取得精确、可靠的检测结果，在药物分析和检测领域具有十分广阔的应用前景。

附图说明

图1为本发明实施例所提供的流动相A的色谱图；