[发明专利]高产纳米硒的光合细菌及其纳米硒活菌制剂的制备方法

权利要求书

1.一株高产纳米硒的光合细菌，其特征在于：所述菌株的分类命名为桃红荚硫菌（Thiocapsa roseopersicina），其保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），编号为CGMCC NO.10344,保藏日期为2015年1月12日,保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.利用权利要求1所述的高产纳米硒的光合细菌制备的纳米硒活菌制剂的制备方法，其特征在于：采用桃红荚硫菌（Thiocapsa roseopersicina）菌种按以下步骤进行培养：

、半固体种子活化培养：将桃红荚硫菌种穿刺在半固体光合细菌培养基中，25-35℃光照培养7-10天，待穿刺的菌线变红并长出菌苔，即可为活化的菌种；

、种子培养：将活化的菌种接种至种子液体培养基中，温度25-35℃，光照强度为：1000-3000lux，光照厌氧培养7-10天，检测种子的OD650≥1.2，活菌数≥6亿cfu/ml即为种子培养液；

、发酵培养：将桃红荚硫菌种子培养液与发酵培养基以1：4-1：5的接种量接种，在光照培养罐中厌氧培养，培养温度25-35℃，光照强度为：2000-6000lux，搅拌速度为120转/分钟，培养至第5-6天，检测其纳米硒的转化率≥88%，活菌含量≥20亿cfu/ml；开始补加烟酸至烟酸总浓度为0.1-18g/L，继续培养2-3天，待检测其纳米硒含量≥1 g/L，纳米硒转化率≥90%，即可放罐，灌装，包装成品；

其中，所述的半固体光合细菌培养基为：氯化铵0.4-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-4 g/L,碳酸氢钠2-5g/L，九水硫化钠0.1-1g/L，酵母膏0.1-1g/L，微量元素1mL，琼脂8-10g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2,其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；

其中，所述的种子液体培养基为：氯化铵0.4-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-4 g/L, 碳酸氢钠2-5g/L，九水硫化钠0.1-1g/L，酵母膏0.1-1g/L，烟酸0.05-0.1 g/L, 微量元素1mL， 121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2,其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；

其中，所述的发酵培养基为：氯化铵0.8-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠3-8 g/L，碳酸氢钠3-8g/L，酵母膏0.1-1g/L，红糖0.1-1g/L，亚硒酸钠0.5-25g/L，氯化钠4-10g/L，烟酸0.05-0.1 g/L, 微量元素1mL，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2；

其中，所述的微量元素为：七水硫酸亚铁0.2g，四水氯化锰0.1g，硼酸0.1 g，六水氯化钴0.1 g，氯化锌0.1 g，二水钼酸钠0.02 g，二水氯化铜0.01 g，蒸馏水1000mL。