[发明专利]人源性肿瘤异种移植模型的构建方法在审
申请号: | 201911404994.2 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN111110385A | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
发明(设计)人: | 朱燕萍;王志强;郝艳鹏;陈馨;叶琳璐 | 申请(专利权)人: | 南京普恩瑞生物科技有限公司 |
主分类号: | A61D1/00 | 分类号: | A61D1/00 |
代理公司: | 北京市兰台律师事务所 11354 | 代理人: | 张峰 |
地址: | 210000 江苏省南京市江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人源性 肿瘤 移植 模型 构建 方法 | ||
本发明公开了一种人源性肿瘤异种移植模型的构建方法,包括:(1)取临床患者来源的新鲜的肿瘤组织,储存于保存液中;(2)选择免疫缺陷小鼠进行麻醉;将小鼠右侧卧位放好,消毒后切开背部皮肤至腹膜暴露肾脏;(3)将保存液中的肿瘤组织进行剪切;(4)将剪切好的肿瘤组织植入到小鼠的肾包膜下,成功接种后送回小鼠的肾脏,缝合伤口;以及(5)将小鼠保温复苏,待小鼠清醒后送回笼盒。该构建方法中能够促进肿瘤微血管的生成,与皮下接种进行相比,提高了出瘤时间短,成瘤较快,瘤特定生长率更,所得肿瘤组织更大,提高了临床患者来源肿瘤异种移植的建模成功率,可用于对肿瘤化疗药物进行敏感性实验,可在最短的时间内做体内药效筛选。
技术领域
本发明涉及一种肿瘤移植技术领域,特别是关于一种人源性肿瘤异种移植模型的构建方法。
背景技术
恶性肿瘤成为危害人体健康的一大难题,目前临床肿瘤化学治疗多依经验组方,带有很大的不确定性。目前肿瘤治疗的个体化和临床疗效的确定性,消除了无效化疗药对病人的损害,是临床化疗的迫切要求。而肿瘤化疗药敏实验是解决这一问题的最佳途径。人源性肿瘤组织异种移植模拟肿瘤生长环境和体内用药环境,发展前景广阔。
人源性肿瘤组织异种移植(PDTX)技术指将肿瘤患者的新鲜肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠上,在小鼠上培育出人的肿瘤组织。此技术保持了人源肿瘤的原始多样性,更好的模拟了肿瘤细胞在人体内的生长环境。然而部分模型难以在皮下成瘤。
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种人源性肿瘤异种移植模型的构建方法,其可在血管丰富的肾包膜进行肿瘤组织接种,促进肿瘤微血管的生成,进而提高临床患者来源肿瘤异种移植的建模成功率。
为实现上述目的,本发明提供了一种人源性肿瘤异种移植模型的构建方法,包括如下步骤:
(1)取临床患者来源的新鲜的肿瘤组织,储存于保存液中,运输至实验室;(2)选择免疫缺陷小鼠进行麻醉;麻醉生效后,将小鼠右侧卧位放好,消毒后切开背部皮肤至腹膜暴露肾脏;(3)将所述保存液中的肿瘤组织进行剪切;(4)将剪切好的肿瘤组织植入到小鼠的肾包膜下,成功接种后送回小鼠的肾脏,缝合伤口;以及(5)将小鼠保温复苏,待小鼠清醒后送回笼盒。
在一优选的实施方式中,上述肿瘤组织是人胃肠道肿瘤组织。
在一优选的实施方式中,上述保存液包括:青链霉素双抗、胎牛血清和L-15培养基,所述青链霉素双抗、胎牛血清和L-15培养基的体积比是1∶15-50∶30-100。
在一优选的实施方式中,上述青链霉素双抗、胎牛血清和L-15培养基的体积比是1∶15-50∶30-100。
在一优选的实施方式中,上述青链霉素双抗、胎牛血清和L-15培养基的体积比是1∶30∶69。
在一优选的实施方式中,步骤(3)中,将上述保存液中的肿瘤组织剪切至(1-4)mm*(1-4)mm*(1-4)mm。
在一优选的实施方式中,步骤(3)中,将上述保存液中的肿瘤组织剪切至(2-3)mm*(2-3)mm*(2-3)mm。
在一优选的实施方式中,步骤(3)中,将上述保存液中的肿瘤组织剪切至2mm*2mm*2mm。
与现有技术相比,根据本发明具有如下有益效果:
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