[发明专利]一种鉴别水稻GS5基因和GLW7基因类型的引物及其应用

权利要求书

1.一种鉴别GS5基因和GLW7基因类型的引物，其特征在于，包括如下引物：

(1)鉴别GS5基因类型的引物：其核苷酸序列如SEQ ID NO.：1～2所示；

(2)鉴别GLW7基因类型的引物：其核苷酸序列如SEQ ID NO.：3～4或SEQ ID NO.：5～6所示。

2.一种鉴别GS5基因或GLW7基因类型的试剂，其特征在于，包括SEQ ID NO.：1～6任一所示引物。

3.一种鉴别GS5基因和GLW7基因类型的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)提取待测水稻的基因组DNA；

(2)以步骤(1)得到的DNA为模板、SEQ ID NO.：1～2或SEQ ID NO.：3～4或SEQ ID NO.：5～6所示序列为引物分别进行PCR扩增；

(3)SEQ ID NO.：1～2所示引物扩增得到的产物用AluI内切酶进行酶切处理，SEQ IDNO.：3～4所示引物扩增得到的产物用HinfI内切酶进行酶切处理；然后将酶切产物与SEQID NO.：5～6所示引物的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳；

(4)若SEQ ID NO.：1～2所示引物的PCR产物以AluI内切酶酶切后得到片段大小为229bpbp，则该水稻中GS5基因型为AAAC；若AluI内切酶酶切后得到片段大小为262bp，则水稻中GS5基因型为AAACAAAC；

若SEQ ID NO.：3～4所示引物的PCR产物以HinfI内切酶酶切后得到99bp，则该水稻中GLW7基因型为CTTCCACTTCCA，若HinfI内切酶酶切后得到片段大小为133bp，则该水稻中GLW7基因型为CTTCCACTTCCACTTCCA；

若SEQ ID NO.：5～6所示引物的PCR得到的片段大小为98bp则该水稻中GLW7基因型为CTTCCACTTCCA，若得到的片段大小为107bp，则该水稻中GLW7基因型为CTTCCACTTCCACTTCCA。

4.根据权利要求3所述的鉴别GS5基因和GLW7基因类型的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述PCR扩增的条件如下：94℃变性3分钟，随后进行35个循环的“94℃变性20秒-55℃退火30秒-72℃延伸20秒”，最后72℃延伸5分钟。