[发明专利]一种美容抗衰制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种美容抗衰制剂，其特征在于，包括自体富血小板血浆、透明质酸和自体成纤维细胞。

2.根据权利要求1所述的一种美容抗衰制剂，其特征在于，自体富血小板血浆和透明质酸的体积比为(4-7):1，自体成纤维细胞的含量为3×10⁷-8×10⁷个/ml。

3.根据权利要求1或2所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，包括自体成纤维细胞的制备，自体成纤维细胞的制备包括以下步骤：

步骤(1)：从皮肤组织中分离出真皮层；

步骤(2)：使用组织块贴壁法对真皮层进行原代培养，获得原代成纤维细胞；

步骤(3)：对原代成纤维细胞进行传代培养，获得的成纤维细胞。

4.根据权利要求3所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，从皮肤组织中分离出真皮层的方法为：将皮肤组织剪碎后用胰酶消化，然后用镊子去除表皮层，获得真皮层；或者用分散酶Ⅱ消化皮肤组织，然后用镊子去除表皮层，获得真皮层。

5.根据权利要求4所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，使用组织块贴壁法对真皮层进行原代培养的方法为：使用含有细胞因子的培养基浸润真皮层，然后将真皮层以底层向下的状态铺设在培养瓶底部；将铺设有真皮层的培养瓶放入培养箱中进行贴壁固定处理，然后在培养瓶中加入含有细胞因子的培养基，使得含有细胞因子的培养基液面与真皮层上表面齐平，然后进行过夜培养；次日在培养瓶中补充含有细胞因子的培养基继续进行细胞培养，获得原代成纤维细胞。

6.根据权利要求5所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，培养基中的细胞因子种类以及含量为：成纤维细胞生长因子80-120ng/ml、转化生长因子-β5-15ng/ml和胰岛素样生长因子-I 40-60ng/ml，所述培养基为间充质干细胞培养基。

7.根据权利要求6所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，真皮层在培养瓶中间隔铺设，将铺设有真皮层的培养瓶放入培养箱中进行贴壁固定处理的时长为1-2h。

8.根据权利要求3所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，当步骤(2)中的原代成纤维细胞的细胞融合度达到50-80％时，进行步骤(3)，对原代成纤维细胞进行传代培养。

9.根据权利要求5所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(1)之前还包括预处理：对原始皮肤组织进行消毒灭菌处理后，除去附着在原始皮肤组织上的脂肪组织，获得皮肤组织。

10.根据权利要求3所述的一种美容抗衰制剂的制备方法，其特征在于，还包括自体富血小板血浆的制备，自体富血小板血浆的制备包括以下步骤：取静脉血，450g离心10min，静脉血分层后取上层液体，获得血浆；在20-24℃的条件下，对血浆进行3000g离心15min，将上层液体吸出，取下层血浆沉淀，获得自体富血小板血浆。