[发明专利]李斯特属和6种常见李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法

权利要求书

1.核苷酸序列组合作为被检测靶标在鉴别李斯特菌中的应用，其特征在于，所述核苷酸序列组合如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.16所示，所述应用为非疾病诊断和治疗目的应用；

所述序列SEQIDNO.1用于鉴别李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.2用于鉴别单核细胞增生李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.3~5用于鉴别英诺克李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.6~8用于鉴别绵羊李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.9~13用于鉴别西式李斯特菌；所述序列SEQ IDNO.14用于鉴别威尔氏李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16用于鉴别格氏李斯特菌。

2.用于鉴别李斯特菌的引物组，其特征在于，所述引物组为根据如权利要求1所述核苷酸序列组合设计得到；

所述引物组的序列按5’到3’如SEQIDNO.17~48所示；其中：

SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18为对应SEQ ID NO.1序列的引物对；

SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20为对应SEQ ID NO.2序列的引物对；

SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22为对应SEQ ID NO.3序列的引物对；

SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24为对应SEQ ID NO.4序列的引物对；

SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26为对应SEQ ID NO.5序列的引物对；

SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28为对应SEQ ID NO.6序列的引物对；

SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30为对应SEQ ID NO.7序列的引物对；

SEQ ID NO.31和SEQ ID NO.32为对应SEQ ID NO.8序列的引物对；

SEQ ID NO.33和SEQ ID NO.34为对应SEQ ID NO.9序列的引物对；

SEQ ID NO.35和SEQ ID NO.36为对应SEQ ID NO.10序列的引物对；

SEQ ID NO.37和SEQ ID NO.38为对应SEQ ID NO.11序列的引物对；

SEQ ID NO.39和SEQ ID NO.40为对应SEQ ID NO.12序列的引物对；

SEQ ID NO.41和SEQ ID NO.42为对应SEQ ID NO.13序列的引物对；

SEQ ID NO.43和SEQ ID NO.44为对应SEQ ID NO.14序列的引物对；

SEQ ID NO.45和SEQ ID NO.46为对应SEQ ID NO.15序列的引物对；

SEQ ID NO.47和SEQ ID NO.48为对应SEQ ID NO.16序列的引物对；

所述序列SEQ ID NO.1用于鉴别李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.2用于鉴别单核细胞增生李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.3~5用于鉴别英诺克李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.6~8用于鉴别绵羊李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.9~13用于鉴别西式李斯特菌；所述序列SEQID NO.14用于鉴别威尔氏李斯特菌；所述序列SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16用于鉴别格氏李斯特菌。

3.如权利要求2所述引物组在鉴别李斯特菌中的应用，所述应用为非疾病诊断和治疗目的应用。

4.一种非疾病诊断和治疗目的的鉴别李斯特菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：使用如权利要求2所述引物组对待测样品DNA进行PCR扩增；

S2：进行凝胶电泳检测扩增产物；

S3：观察引物组中各引物对对应产物大小的位置是否存在单一扩增条带，如果存在，说明待测样品中含有对应的李斯特菌；如果没有出现相应的单一扩增条带，则说明待测样品中不含有对应的李斯特菌。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，S1中的PCR扩增体系包括PCR反应缓冲液、模板DNA、PCR聚合酶、dNTP、MgCl_2、引物组和灭菌双蒸水。