[发明专利]一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法

权利要求书

1.一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)含天冬氨酸酶的转化菌的制备：大肠杆菌在发酵培养基中培养发酵，发酵液离心得到湿菌体；

(2)转化菌的预处理：将步骤(1)制备的湿菌体制备成悬浮液，加入1g/L氯化钙溶液在30℃孵化2h；然后于4℃冷藏处理至少2h；得到预处理后的转化菌体；

(3)L-天冬氨酸钙的催化转化：将上述步骤(2)预处理后的转化菌体加入到转化液中，在pH6.5，40℃酶促反应，反应6h；；反应结束后，去除菌体细胞；其中，所述步骤(3)中，所述转化液中，富马酸浓度为50g/L；氨5g/L，氢氧化钙0.03g/L，氯化钙37.5g/L。

(4)脱色：加热去除了菌体细胞的转化液至80～100℃，加入活性炭脱色；过滤，得滤液；

(5)将滤液纯化，得到天门冬氨酸钙产物。

2.如权利要求1所述的一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)滤液纯化的方法包括步骤(5a)或者步骤(5b)；

所述步骤(5a)为：将所述步骤(4)制备的滤液喷雾干燥即得天门冬氨酸钙产物；所述喷雾干燥参数为：进风温度160-200℃，出风温度80-100℃；

所述步骤(5b)包括将步骤(4)得到的滤液打入浓缩釜中，在温度70℃进行真空减压浓缩3.5～5h，得到浓缩液；将得到的浓缩液降温，搅拌结晶5～7h后，离心分离，干燥即得天门冬氨酸钙产物。

3.如权利要求1所述的一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述发酵培养基的制备方法为：富马酸铵10g/L；可溶性淀粉6g/L,蛋白胨7g/L,氯化钠5g/L；磷酸二氢钾1g/L；硫酸镁0.2g/L，将上述原料加适量水溶解，然后用氨水调节ph至7.0-7.2。

4.如权利要求1所述的一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述去除菌体细胞的具体方法位：将酶促反应后的转化液于4000r/min转速下，4℃离心15min。

5.如权利要求1所述的一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，湿菌体和转化液的质量体积比为：按照30g菌体中加入1L转化液计算。