[发明专利]一种富硒乳酸菌制剂及其制备方法在审
| 申请号： | 201911395726.9 | 申请日： | 2019-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN110951651A | 公开（公告）日： | 2020-04-03 |
| 发明（设计）人： | 鄢明辉;刘振民;游春苹;扶晓菲 | 申请（专利权）人： | 光明乳业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/38;C12R1/25 |
| 代理公司： | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人： | 李梦福 |
| 地址： | 201103 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳酸菌 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种富硒乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)活化菌种：将冷冻保存的Lb.plantarum ST-III菌种接种于MRS液体培养基中，在37℃下厌氧培养18-22h，循环传代培养2-3次，得菌体培养物；
(2)制备恩施富硒茶浸出物：称取恩施富硒茶样品2g，加入100℃、100mL的纯净水浸泡10min取上清液，经无菌滤膜过滤，得恩施富硒茶浸出物；
(3)配置MRS-TE培养基：将MRS-Mn培养基自然冷却至室温后加入步骤(2)所得恩施富硒茶浸出物；其中所述恩施富硒茶浸出物加入MRS-TE培养基的质量浓度为0.06％-0.10％；
(4)收集菌体：离心步骤(1)所得的菌体培养物，得菌体；
(5)发酵菌体：将步骤(4)收集的菌体经生理盐水清洗三次后重悬于步骤(3)所得的MRS-TE培养基中，充分摇匀后静置37℃发酵24-48h；
(6)将步骤(5)所得的发酵菌体离心、无菌生理盐水洗涤3次，离心、去上清，即得所述富硒乳酸菌制剂。
2.根据权利要求1所述的富硒乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述无菌滤膜的孔径为0.44μm。
3.根据权利要求1所述的富硒乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(5)中，发酵时间为48h。
4.根据权利要求1所述的富硒乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，恩施富硒茶浸出物的添加量为30mL/L-50mL/L。
5.根据权利要求1所述的富硒乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，所述MRS液体培养基的组成为：10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三钠、1g吐温80、200mg硫酸镁、54mg硫酸锰与1000mL蒸馏水；所述MRS液体培养基的pH值为6.5，灭菌温度为121℃，灭菌时间为15min。
6.根据权利要求1所述的富硒乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，所述MRS-Mn培养基组成如下：10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三钠、1g吐温80、200mg硫酸镁与1000mL蒸馏水；所述MRS-Mn培养基的pH值为6.5，灭菌温度为121℃，灭菌时间为15min。
7.一种富硒乳酸菌制剂，其特征在于，其由权利要求1～6任一项所述的富硒乳酸菌制剂的制备方法直接制得。
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