[发明专利]中药麦冬的指纹图谱检测方法有效
申请号: | 201911389879.2 | 申请日: | 2019-12-30 |
公开(公告)号: | CN111024855B | 公开(公告)日: | 2022-09-09 |
发明(设计)人: | 秦雨程;阙瑞艳;张礼学 | 申请(专利权)人: | 常熟雷允上制药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/54;G01N30/86 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 程斯佳 |
地址: | 215500 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中药 麦冬 指纹 图谱 检测 方法 | ||
1.一种中药麦冬的指纹图谱检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)麦冬供试品溶液制备:
取批量麦冬,分别粉碎,依次过3号筛,分别精密取1~5g,加甲醇20~100ml,浸渍过夜,超声处理20~30min,滤过,滤渣再加甲醇20~100ml,超声处理20~30min,滤过,合并2次滤液,蒸干,残渣加水2~10ml微热使溶解,加于已活化好的安捷伦C18小柱上,以水8ml洗脱,水液弃去,继用20%甲醇8ml~40mL洗脱,洗脱液弃去,最后用甲醇3~15ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解定容至1~5ml,用0.22μm微孔滤膜滤过,即得;
(2)麦冬对照药材溶液的制备;
取批量的麦冬对照药材,分别粉碎,依次过3号筛,分别精密取1~5g,加甲醇20~100ml,浸渍过夜,超声处理20~30min,滤过,滤渣再加甲醇20~100ml,超声处理20~30min,滤过,合并2次滤液,蒸干,残渣加水2~10ml微热使溶解,加于已活化好的安捷伦C18小柱上,以水8ml洗脱,水液弃去,继用20%甲醇8ml~40mL洗脱,洗脱液弃去,最后用甲醇3~15ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解定容至1~5ml,用0.22μm微孔滤膜滤过,即得;
(3)对照品的制备
精密取麦冬皂苷B、麦冬皂苷C和麦冬皂苷D加甲醇溶解成浓度分别为1.5~4.5mg/mL、1.25~2.5mg/mL和2~4mg/mL的混合对照品溶液;
(4)高效液相色谱法测定麦冬的对照药材的指纹图谱:取步骤(2)中的批量麦冬对照药材溶液,注入HPLC进行分析,测得各批次麦冬对照药材的指纹图谱,以这些指纹图谱为基础,用相似度软件计算获得共有模式作为对照指纹图谱;
(5)高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱:取步骤(1)中的批量麦冬供试品溶液按步骤(4)相同的色谱条件注入HPLC进行分析,测得供试品溶液的指纹图谱;
(6)对照品溶液的测定:
取步骤(3)的对照品溶液,按步骤(4)相同的色谱条件注入HPLC进行分析;
(7)将步骤(5)得到的供试品溶液指纹图谱和步骤(4)得到的对照指纹图谱用相似度软件评价,并用步骤(6)的对照品溶液标定特征峰;
步骤(4)中色谱条件为:色谱柱为安捷伦SB C18,型号为:250mm×4.6mm,5μm;流动相:乙腈为A相,含有体积浓度的0.01%的冰醋酸水为B相,梯度洗脱,检测波长:205nm;柱温:30℃;流速:1.0ml/min;进样量:10μl;
梯度洗脱条件为:0~59min,A相35%~62%;59~60min,A相62%;60~61min,A相62~35%;61~70min,A相35%。
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