[发明专利]一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法在审
| 申请号: | 201911389123.8 | 申请日: | 2019-12-30 |
| 公开(公告)号: | CN110896946A | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
| 发明(设计)人: | 戴志华;戴媛;潘洪旭 | 申请(专利权)人: | 贵州汉氏联合生物技术有限公司 |
| 主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 550003 贵州省贵阳市贵阳国家高*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 造血 干细胞 冻存液 方法 | ||
1.一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述冻存液由冷冻保护剂、培养基和人血清白蛋白组成,所述冷冻保护剂由以下成分组成:二甲基亚砜、羟乙基淀粉、生理盐水、聚乙烯吡咯烷酮;所述培养基由以下成分组成:萝卜糖、氨基酸、胎羊血清。
2.如权利要求1所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述冷冻保护剂包括以下重量份成分:二甲基亚砜25ml、羟乙基淀粉5g、生理盐水15ml、聚乙烯吡咯烷酮5g。
3.如权利要求2所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述培养基包括以下重量份成分:萝卜糖1.5g、氨基酸25g、胎羊血清20g。
4.如权利要求1~3任一所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述造血干细胞冻存方法包括以下步骤:
步骤1:按比例1:4:1.2分别称得各比例的冷冻保护剂、培养基和人血清白蛋白;
步骤2:准备一个消毒过的注射器,抽取步骤1称得的组成成分,注入密封容器内,摇晃容器2~3min,使各成分相互混合,形成细胞悬液;
步骤3:将步骤:2中含有的细胞悬液的密封容器至于冷冻袋内,袋口密封;
步骤4:将冷冻带程序性降温至-80℃后,按储存要求放入液氮罐中进行冻存。
5.如权利要求3所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述培养基内还有如下重量份成分:运铁蛋白5g。
6.如权利要求4所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,按比例1:4:1分别称得各比例的冷冻保护剂、培养基和人血清白蛋白。
7.如权利要求4所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,按比例1.2:4:1.2分别称得各比例的冷冻保护剂、培养基和人血清白蛋白。
8.如权利要求1所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述冻存液由冷冻保护剂、培养基和胎牛血清组成,所述培养基内的胎羊血清替换成人血清白蛋白,人血清白蛋白为以下重量份成分:人血清白蛋白25g。
9.如权利要求8所述的一种造血干细胞冻存液,其特征在于,所述冻存方法包括以下步骤:
步骤1:按比例1:4:1分别称得各比例的冷冻保护剂、培养基和胎牛血清;
步骤2:准备一个消毒过的注射器,抽取步骤1称得的组成成分,注入容器内,轻度吹打2~2.5min,使各成分相互混合,形成细胞悬液;
步骤3:将步骤2中的细胞悬液的分装至2ml的冻存管中;
步骤4:将冻存管程序性降温至-80℃后,按储存要求放入-196℃液氮罐中进行冻存。
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