[发明专利]一种单细胞克隆培养方法有效
| 申请号： | 201911387697.1 | 申请日： | 2019-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN111826285B | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 包骥;步宏;李顺;张芸琳 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院;成都华西精准医学产业技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12M3/00 | 分类号： | C12M3/00;C12N5/02;C12N5/10;C12N15/90;C12N5/09;C12N5/20 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 单细胞 克隆 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种单细胞克隆培养方法，其特征在于：它是将细胞接种于单细胞克隆培养容器进行培养；所述单细胞克隆培养容器是底表面带有纤连蛋白印迹块阵列的细胞培养容器；所述底表面未覆盖纤连蛋白的区域被封闭剂封闭；所述封闭剂为Pluronic F-127；单个所述印迹块的面积为225~625μm2；所述单细胞克隆培养方法还包括接种1~3h后，在显微镜下破坏粘连了2个以上细胞的印迹块。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述容器为培养皿、培养盒、培养板或培养瓶。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：每个所述印迹块的面积大小为225~400μm2。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，平均每1000个印迹块对应接种细胞数为500~5000。
5.如权利要求1~4任一所述的方法，其特征在于，它还包括：
待细胞长出肉眼可见的细胞球后，取出细胞球，扩大培养。
6.权利要求1~5任一所述的方法在基因编辑细胞筛选、肿瘤克隆培养、单细胞测序样品制备或单克隆杂交瘤制备中的应用。
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