[发明专利]一种耐盐反硝化细菌菌株、菌液、筛选方法和应用

说明书

本发明公开了一种耐盐反硝化细菌菌株、菌液、筛选方法和应用，提供了该菌种的培养方法及其在降解高盐高硝态氮废水中对硝态氮的处理工艺。该菌株是从高含盐废水排污口附近的污泥中分离，并经过循环驯化得到的，经鉴定该菌株为粪产碱菌（Alcaligenes faecalis）。该菌株可以在较高盐度（废水盐浓度最高负荷40g/L）环境下有效降解废水中的硝态氮，硝态氮的去除率达到90%，总氮的去除率达70%。该处理工艺操作简单，出水水质良好，处理成本低，硝态氮去除率高。

技术领域

本发明涉及微生物分离和应用的技术领域，更具体地说，它涉及一种耐盐反硝化细菌菌株、菌液、筛选方法和应用。

背景技术

近年来，氮素污染已成为我国地表水环境安全的一大隐患，水体中氨氮污染不仅会引起富营养化等一系列环境问题同时也威胁着人类健康。以微生物为主体的生物修复技术以其高效率、低成本的优势在污染水体脱氮中展示出了巨大的应用前景。微生物通过反硝化作用，将NO^3-或NO^2-还原为气态氮释放至大气，是整个地球氮素循环过程中的关键步骤，在整个氮循环过程中占有重要的地位。

在反硝化过程中一般以有机碳作为电子供体，硝酸盐或亚硝酸盐作为电子受体。除细菌外，古菌、真核生物都能够进行反硝化作用。微生物的生长、繁殖以及代谢活动受外界环境条件的影响较大，如温度、pH、营养物质，不同种类微生物最适生长条件差异非常大。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的第一个目的在于提供一种耐盐反硝化细菌菌株，其具有耐受高盐、高硝态氮浓度的优点。

本发明的第二个目的在于提供一种耐盐反硝化细菌菌株的筛选方法，其具有高效、快速筛选耐高盐高硝态氮废水的降解菌，且能够保证该菌耐高盐高硝态氮性质稳定性的优点。

本发明的第三个目的在于提供一种采用上述耐盐反硝化细菌菌株制备的菌液，该菌液应用于高盐高硝态氮废水中，进行硝态氮的高效降解。

本发明的第四个目的在于提供一种耐盐反硝化细菌菌株在高盐高硝态氮废水治理中的应用，该菌种对高盐高硝态氮废水的处理工艺操作简单、出水水质良好、硝态氮和总氮的脱除率高。

为实现上述第一个目的，本发明提供了如下技术方案：一种耐盐反硝化细菌菌株，所述耐盐反硝化细菌菌株为粪产碱菌（Alcaligenes faecalis），命名为HQFXH-11，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，地址：中国，北京，保藏编号为：CGMCC No.19105，保藏时间：2019年12月6日。

进一步地，所述粪产碱菌单菌落为黄白色、干燥、不规则圆形且不透明状态。

为实现上述第二个目的，本发明提供了如下技术方案：

一种耐盐反硝化细菌菌株的筛选方法，包括以下步骤：

S1反硝化菌株的分离：

菌种驯化：将从高含盐废水排污口附近采集样本，称取适量样本悬浮于无菌水中，在室温下接种至反硝化培养基（NM）中，所述反硝化培养基的成分为：硝酸钾为0.01-1.0g/L，氯化钠为10-60g/L，磷酸二氢钾0.01-1.0g/L，乳酸钠为0.1-5g/L，121℃灭菌20min后冷却至室温后接种；每隔3d检测其中NO₃^-、NO₂^-以及NH₄⁺，直至硝酸盐去除率为100%且去除速率稳定，得到初筛的水样的菌液；

涂布培养：取1mL经过初筛的水样的菌液均匀涂布于固体显色培养基（GN），涂布，30℃恒温培养箱中培养，得到蓝色的单菌落；