[发明专利]一种减振式显微观测方法

说明书

本发明涉及光学显微成像技术领域，具体涉及一种减振式显微观测方法，包括步骤：S100将对活体动物进行成像实验和/或电生理实验的显微镜和/或带膜片钳的显微镜安装到主平台上；S200将活体动物的头部固定住，让活体动物的四肢由隔离主平台水平震动的子平台上的运动台支撑，调节显微镜的位置对准活体动物脑部进行成像实验和/或电生理实验的观测。本发明避免了多种实验间的相互干扰，防止带膜片钳的显微镜在实验过程中膜片微电极脱离开细胞，提高成像实验和电生理实验的成功率，同时可以使用多个子平台进行多项实验，让实验效率更高。

技术领域

本发明涉及光学显微成像技术领域，具体涉及一种减振式显微观测方法。

背景技术

实验用活体动物是对癌症、动脉粥样硬化、神经系统疾病(如阿尔茨海莫氏病)和传染病等疾病进行研究不可缺少的实验样本，常用的实验用活体动物包括小鼠，大鼠和狨猴等。在生物实验研究过程中，由于活体显微成像技术可用于研究观测特异性细胞、基因和分子表达或相互作用关系、追踪靶细胞以及从分子和细胞水平对药物疗效进行成像，评估疾病发展过程，通常需要对施加了实验手段的活体动物进行活体显微成像或电生理实验。

因为多光子荧光显微成像所用的超快激光光源非常昂贵，所以，大多数生物成像实验室是通过在一个光学减震平台安装多台显微镜以共享光源并提高实验效率。在同一个光学减震平台上进行的实验包括：A.麻醉活体动物显微成像(不带膜片钳的显微镜)实验、B.麻醉活体动物电生理实验(带膜片钳的显微镜)、C.头部固定且清醒活体动物显微成像(不带膜片钳的显微镜)实验和D.头部固定且清醒活体动物电生理实验(带膜片钳的显微镜)，在该光学减震平台上进行A、B、C和D四种实验时，由于活体动物的头部固定，而身体的其余部分，如四肢等可以在运动装置上自由运动，活体动物在活动时产生的震动容易让该普通光学减震平台上的多台显微镜也产生震动，从而造成：A实验过程中不受A和B实验中活体动物的影响，A实验过程中受到C和D实验中活体动物运动的影响；B实验过程中不受A和B实验中活体动物的影响，B实验过程中受到C和D实验中活体动物运动的影响；C实验过程中不受A和B实验中活体动物的影响，C实验过程中受到C和D实验中活体动物运动的影响；D实验过程中不受A和B实验中活体动物的影响，D实验过程中受到C和D实验中活体动物运动的影响。

电生理实验时使用的带膜片钳的显微镜，是神经科学研究过程中在脑功能成像的同时进行电生理信号记录的设备，脑功能成像主要是针对脑神经细胞活动的成像，由于活体动物在脑神经细胞兴奋时会产生钙离子的跨膜流动，钙离子在遇到钙离子敏感染料时会变色，进而能够进行成像，且钙离子的跨膜流动会导致脑神经细胞的电位产生变化，所以，电生理信号记录通过将膜片微电极接触到一个细胞的细胞膜上并以高阻抗进行封接，使与电极尖开口处接触的小区域细胞膜与其周围细胞膜在电学上分隔，达到对脑神经细胞固定点位的目标，对该固定点位的细胞膜的离子通道的离子电流进行监测记录达到目的。

现有的活体动物的活体显微成像装置包括放置显微镜的光学减震平台、载物台、激光式的显微镜和激光光源，使用该现有光学减震平台时，由于多个实验过程中活体动物运动造成的光学减震平台的水平震动，水平震动会造成同一光学减震平台上多台显微镜的相互干扰，导致安装在同一光学减震平台上的邻近的显微镜观察图像的震动以至于影响观察效果，水平震动让带膜片钳的显微镜的震动，使得膜片微电极极容易脱离开细胞膜，导致要重新将膜片微电极接触到细胞膜上，而膜片微电极通常要经过多次实验才能接触到相应的细胞上，在膜片微电极脱离开细胞膜后难以再次找到之前的同一个细胞进行实验，增大了实验失败率。

发明内容

本发明意在提供一种减振式显微观测方法，以解决活体动物在实验过程中运动造成实验失败的问题。

本方案中的减振式显微观测方法，包括以下步骤：

S100，将对活体动物进行成像实验和/或电生理实验的显微镜和/或带膜片钳的显微镜安装到主平台上；