[发明专利]从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法

说明书

本发明提供了本发明提供了一种从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，包括以下步骤：(一)菌种分离：配制接种液，再将接种液接种到乙酸钠限制性固体培养基上培养后，挑选单菌落分别划线纯化培养；(二)菌种富集：将纯化培养得到的菌株分别放入MOPS‑乙酸钠液体培养基振荡培养，得到富集菌液；(三)高效脱氮菌筛选：富集菌液和自配水混匀，并加入不具有脱氮活性污泥混合液，振荡培养后NH₄Cl，然后曝气，检测氨氮含量，选出脱氮效果最为明显的脱氮菌株。本发明实现对序批式吡啶废水活性污泥中高效脱氮菌的分离，本方法操作简单，效果明显，为将来微生物改造，污水水处理，尤其是污水脱氮奠定了物质基础。

技术领域

本发明涉及微生物分离和筛选技术领域，具体涉及一种从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法。

背景技术

脱氮是为防止水体富营养化而对废水进行除氮的过程。一般分为物理化学法和生物法脱氮两种。物理化学法有气体脱氮法、离子交换法、氯处理法等，通常很少采用。实践中多采用硝化-反硝化作用的生物脱氮法对废水进行处理。目前已对活性污泥法、生物膜法处理过程中的嫌气反应与好气反应经过各种形式组合设计出多种处理程序。

SBR是序批式活性污泥法的简称，是一种按间歇曝气方式来运行的活性污泥污水处理技术。它的主要特征是在运行上的有序和间歇操作，SBR系统的核心是SBR反应池，该池集均化、初沉、生物降解、二沉等功能于一池，无污泥回流系统。近年来序批式活性污泥法(SBR) 处理养猪场废水越来越受到关注，该工艺相对比于其他工艺简单、剩余污泥处置麻烦少、节约投资投资省、占地少、运行费用低、耐有机负荷和毒物负荷冲击，运行方式灵活，由于是静止沉淀，因此出水效果好、厌(缺)氧和好氧过程交替发生、泥龄短、活性高，有很好的脱氮除磷效果。且有通过氧化还原电位实时控制SBR反应进程的报道，进一步提高了对氮磷的去除效果、节约了能源和投资。

SBR系统优越脱氮性能主要来源于SBR系统中高效脱氮菌，具有高效脱氮性能的脱氮菌可以进一步增加了SBR系统的污水处理能力，提高处理效率，实现废水高效而经济的脱氮。目前序批式吡啶废水活性污泥中脱氮菌脱氮性能参差不齐，导致SBR系统的污水处理不理想，因此，亟需一种分从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌，以提高序批式性污泥法处理废水的能力。

发明内容

本发明目的是为了弥补已有技术缺陷，提供一种从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，实现对序批式吡啶废水活性污泥中高效脱氮菌的分离。

为实现上述目的，本发明通过以下方案予以实现：

本发明提供了一种从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，包括以下步骤：

(一)菌种分离：将含有驯化菌种的活性污泥混合液、NaCl溶液、 Na5P3O10溶液、Tween80溶液混合均与得到接种液，再将接种液倍比稀释接种到乙酸钠限制性固体培养基上，在28±0.5℃条件下培养6～10 天后挑选单菌落分别划线纯化培养；

(二)菌种富集：将纯化培养得到的菌株分别放入MOPS-乙酸钠液体培养基，在28±0.5℃、180r/min的环境中振荡培养3～5天，得到富集菌液；

(三)高效脱氮菌筛选：在无菌条件下将富集菌液和自配水按5∶ 3的体积比混匀，并加入占富集菌液和自配水总体积0.2～1.2％不具有脱氮活性污泥混合液，在10～50r/min的厌氧环境中振荡培养2.5～3.5h 后转入另一容器内加入占富集菌液和自配水总质量1.5～2％的NH₄Cl，然后曝气使溶解氧浓度为0.5～5mg/L，检测氨氮含量，选出脱氮效果最为明显的脱氮菌株。

优选地，接种液按体积比由20％含有驯化菌种的活性污泥混合液、 78.8％NaCl溶液、1％Na₅P₃O₁₀溶液和0.2％Tween80组成。