[发明专利]一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白B单试剂

说明书

本发明公开了一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白B单试剂，包括PH值为7.0～8.0的缓冲液20～200mmol/L、经抗体处理液预沉淀并离心处理的ApoB抗体40.0～200.0g/L、聚乙二醇2000～10000 5.0～50.0g/L、丙三醇20.0～200.0g/L、表面活性剂0.5～5.0g/L、防腐剂0.2～2.0g/L，所述抗体处理液包括PH值为7.0～8.0的缓冲液20～200mmol/L、聚乙二醇2000～10000 30.0～80.0g/L、镁盐5.0～30.0g/L、防腐剂0.2～2.0g/L。低温条件下，在一定浓度的聚乙二醇及镁盐的促进作用下，抗体中易沉淀蛋白质加速沉淀，再通过高速离心，去除沉淀，实现单试剂中抗体与非特异性聚乙二醇类增敏剂共存时稳定性的提升，防止试剂冰冻后蛋白析出或沉淀，从而影响试剂的性能。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，尤其涉及一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白B单试剂。

背景技术

载脂蛋白B(ApoB)主要在肝脏合成，是低密度脂蛋白(LDL)的主要结构蛋白，并作为LDL受体的配体，可调节LDL从血浆中的清除速率。血液中ApoB 的测定值直接反应LDL含量。

ApoB水平高低的临床意义与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)相似，是各项血脂指标中较好的动脉硬化标志物。在少数情况下，可出现高ApoB血症而 LDL-C正常的情况，提示血液中存在较多小而密的LDL，测定ApoB更有优势。在对高ApoB血症的冠心病患者实施药物干预实验中表明，降低ApoB水平可以减少冠心病发病及促进粥样斑块的消退。此外，ApoB增高也常见于肾病综合征、未控制的糖尿病、活动性肝炎和肝功能低下患者。

多种免疫分析技术均可用于载脂蛋白B的检测，如免疫扩散、免疫电泳、酶联免疫法等，这些检测方法成本低、结果易于判断、技术上便于掌握。但方法操作繁琐，费时且灵敏度和精确度差而趋于被淘汰。免疫比浊法克服了上述缺点，是目前最常用的方法。它具有免疫学抗原、抗体结合的特异性，又具有生物化学反应学特点，简单快速、可用于自动化分析，且样本通量大，因此受到临床广泛推广。

免疫比浊法原理：血清中的载脂蛋白B，可与试剂中特异性抗体结合形成不溶性复合物而产生浊度，浊度的高低与样本中载脂蛋白B的浓度成正比。因此，可在特定波长处，通过多点定标法来测得样本中载脂蛋白B的浓度。

现有技术未涉及液体单试剂的配方，主要为未能解决单试剂中特异性抗体与非特异性聚乙二醇类增敏剂共存的稳定性问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白B单试剂，通过特殊的处理方法(抗体处理液预沉淀及高速离心处理)去除抗体中易沉淀的相关蛋白质，实现单试剂中抗体与非特异性聚乙二醇类增敏剂共存时稳定性的提升，防止试剂冰冻后蛋白析出或沉淀，从而影响试剂的性能。

为实现上述目的，本发明提供了一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白B单试剂，包括PH值为7.0～8.0的缓冲液20～200mmol/L、抗体处理液离心处理后的ApoB抗体40.0～200.0g/L、聚乙二醇2000～100005.0～50.0g/L、丙三醇20.0～200.0g/L、表面活性剂0.5～5.0g/L、防腐剂0.2～2.0g/L，所述抗体处理液包括PH值为7.0～8.0的缓冲液20～200mmol/L、聚乙二醇2000～1000030.0～ 80.0g/L、镁盐5.0～30.0g/L、防腐剂0.2～2.0g/L。

其中，所述表面活性剂包括曲拉通X-100、月桂醚35或吐温中的一种。

其中，所述防腐剂包括叠氮钠、Proclin300或乙酸乙酯钠中的一种。

其中，所述缓冲液包括PH在7.0～8.0范围内的磷酸盐缓冲液、N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸缓冲液或Tris-盐酸缓冲液中的一种。

其中，所述镁盐包括硫酸镁、醋酸镁或氯化镁中的一种。