[发明专利]一种藻菌共培养体系促进微生物诱导碳酸钙沉淀的方法在审
申请号: | 201911369892.1 | 申请日: | 2019-12-26 |
公开(公告)号: | CN111088166A | 公开(公告)日: | 2020-05-01 |
发明(设计)人: | 周文广;徐品品;陈甫风;钟凤;陈思华;戈成祥;李晶晶 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12N1/20;C12P3/00;C12R1/89;C12R1/01 |
代理公司: | 南昌市平凡知识产权代理事务所 36122 | 代理人: | 夏材祥 |
地址: | 330013 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 藻菌 培养 体系 促进 微生物 诱导 碳酸钙 沉淀 方法 | ||
1.一种藻菌共培养体系促进微生物诱导碳酸钙沉淀的方法,其特征在于:所述的方法包括以下步骤:
步骤1:将处于对数增长期的微藻和脲酶细菌分开预处理后,得到的藻细胞悬浮液与菌细胞悬液按1∶1000~1000∶1的体积比例细混合共培养,通过测定共培养体系中叶绿素a的含量反映共培养过程中微藻的生长情况,确藻细胞悬浮液与菌细胞悬液适宜的混合体积比例;
所述的预处理为:原藻液或原菌液经过离心后,藻或菌细胞沉淀物质经过无菌水2~3次洗涤,加入与原藻液或原菌液等体积的无菌改良BBM培养基,制备相应的藻细胞悬浮液或菌细胞悬浮液;其中离心转速为2000~20000rpm,温度为0~50℃,离心时间1~100min;共培养的条件:培养温度为0~60℃,光强度为0~100000 Lux,转速0~300rpm,培养周期为1~30d;
步骤2:将步骤1藻细胞悬浮液与菌细胞悬浮液按1∶1000~1000∶1的体积比例进行混合,进行第二轮共培养,待共培养体系中的微藻增长至对数增长期时,取适量藻菌共培养液与等体积的钙化液进行微生物诱导碳酸钙沉淀,其条件为:静置培养,温度0~60℃,光照强度0~3000Lux,每天摇动培养瓶0~10次直至周期结束,培养周期为0~60d;
所述的第二轮共培养的体系中,微藻的叶绿素a浓度应达到16~20mg/L;钙化液为钙盐与尿素等质量浓度混合配制的溶液,其中Ca2+浓度为0.01~40g/L。
2.根据权利要求1所述的一种藻菌共培养体系促进微生物诱导碳酸钙沉淀的方法,其特征在于:所述的微藻为小球藻,螺旋藻或集胞藻。
3.根据权利要求1所述的一种藻菌共培养体系促进微生物诱导碳酸钙沉淀的方法,其特征在于:所述的脲酶细菌为芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌或巴氏芽孢杆菌。
4.根据权利要求1所述的一种藻菌共培养体系促进微生物诱导碳酸钙沉淀的方法,其特征在于:所述的改良BBM培养基是在BBM培养基的基础上,再添加质量浓度分别为0.01g/L~20g/L的葡萄糖和0.01g/L~50g/L的Tris盐;
所述的BBM培养基的配方为:硝酸钠0.25g/L,磷酸氢二钾0.075g/L,硫酸镁0.015g/L,氯化钙0.025g/L,硫酸二氢钾0.175g/L,氯化钠0.025g/L,微生素B1 0.001 g/L,微量元素H0.25μg/L,维生素B12 0.15μg/L,乙二胺四乙酸二钠 0.75g/L,氯化锰0.041g/L,氯化锌0.005g/L,钼酸钠0.004g/L,氯化铁0.097g/L,氯化钴0.002g/L。
5.根据权利要求1所述的一种藻菌共培养体系促进微生物诱导碳酸钙沉淀的方法,其特征在于:所述的钙盐为可溶性钙盐氯化钙、硝酸钙或乙酸钙。
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