[发明专利]一种制备结合位点可控的PEG化生物分子的方法

权利要求书

1.一种制备结合位点可控的PEG化生物分子的方法，包括如下步骤：

(1)阻隔物与生物分子中至少一个结合位点结合；

(2)PEG化生物分子；

(3)将阻隔物与生物分子分离；

其中，所述步骤(1)中生物分子选自与阻隔物具有特异性结合作用的生物大分子或小分子，所述生物分子上具有至少一个阻隔物的结合位点；

阻隔物与生物分子选自如下组合：配体与受体、DNA与其互补的DNA或RNA、酶与其底物、酶与其竞争性抑制剂、酶与其辅酶因子、维生素与其特异性结合蛋白、糖蛋白与其相应的凝集素；优选的，所述配体与受体选自：激素与受体、药物与受体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述DNA与其互补的DNA或RNA选自：基因探针与碱基互补的基因序列；

所述酶与其底物选自：蛋白酶与蛋白质、淀粉酶与淀粉、核酸酶与核酸、乳酸脱氢酶与乳酸、草酰乙酸脱羧酶与草酰乙酸；

所述酶与其竞争性抑制剂选自：琥珀酸脱氢酶与丙二酸、二氢叶酸合成酶与磺胺类药物、胆碱酯酶与有机磷农药、巯基酶与路易士气；

所述酶与其辅酶因子选自：丙酮酸脱氢酶与Mn2⁺、过氧化氢酶和氧化还原酶与Fe2⁺/Fe3⁺；

所述激素与受体选自：雌激素与雌激素受体、雄激素与雄激素受体、盐皮质激素与盐皮质激素受体、甲状腺激素与甲状腺激素受体、孕激素与孕激素受体；

所述药物与受体选自：胰岛素、胰岛素样生长因子、上皮生长因子、血小板生长因子及淋巴因子与具有酪氨酸激酶活性的受体、肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、M-乙酰胆碱、阿片类、嘌呤类、前列腺素及多肽激素类药物与G-蛋白偶联受体；优选的，所述药物与受体选自：叶酸与叶酸受体、IL与IL受体；

所述维生素与其特异性结合蛋白选自：维生素A与视黄醇结合蛋白、维生素D与维生素D结合蛋白、α-生育酚与α-生育酚转运蛋白、维生素K与脂蛋白；

所述糖蛋白与其相应的凝集素选自：辣根过氧化物酶与刀豆凝集素A、扁豆凝集素和豌豆凝集素、木菠萝素与半乳糖、苋科凝集素与N-乙酰半乳糖胺、二聚体几丁质结合凝集素与N-乙酰氨基葡萄糖寡聚糖、双花扁豆素与血型A物质、荆豆凝集素与血型O物质2-L-岩藻糖。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述药物与受体选自：IL-2与IL-2受体，IL-2受体包括IL-2α受体、IL-2β受体、IL-2γ受体。

4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中将阻隔物与生物分子分离的方法包括：离心分离、沉淀分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、膜分离、层析分离、电泳分离、梯度洗脱中的一种或两种以上的组合。