[发明专利]一种测定饲料中乳糖、果糖、葡萄糖含量的方法

说明书

本发明涉及一种测定饲料中乳糖、果糖、葡萄糖含量的方法，该方法包括以下步骤：1)将饲料分散于水中，先进行恒温水浴提取，再进行超声提取；2)加入三氯乙酸溶液，静置后离心分离，取上清液作为待测液；3)采用高效液相色谱对待测液进行检测。与现有技术相比，本发明先依次进行恒温水浴提取及超声提取，再利用三氯乙酸溶液沉淀饲料中的蛋白，之后通过高效液相色谱对离心后得到的待测液进行检测，不仅样品制备时间短，过程简单易操作，乳糖、果糖、葡萄糖提取充分，且检测精度高，效果好，实现了短时间内对一份饲料样品中乳糖、果糖、葡萄糖含量的同时检测。

技术领域

本发明属于饲料成分检测技术领域，涉及一种测定饲料中乳糖、果糖、葡萄糖含量的方法。

背景技术

饲料中添加乳糖、果糖、葡萄糖等糖类，不仅能掩盖饲料原有的不良味道，提高幼龄家畜禽和鱼类、尤其是猪的采食量和饮水量，还能改善饲料转化率，促进饲料的消化吸收和利用，且适量的低聚糖类还可提高动物的免疫能力，改善动物的生长性能，防止或减少腹泻和便秘。其中，乳糖、葡萄糖等天然糖类作为饲料甜味剂，由于甜度较低，往往单一添加量较大。因此，需要同时将几种糖类进行组合，才能起到协同效果，节约成本。然而，目前国家对于饲料中糖类的添加量并无限制要求，全屏饲料生产厂家自己控制。若添加不足，则起不到理想效果；若添加过量，不仅使饲料成本过高，可能某些低聚糖类还易导致动物渗出性腹泻。因此，控制好动物饲料中的乳糖、果糖、葡萄糖含量对现代养殖家畜禽和鱼类生长发育至关重要。

现有的饲料成分检测方法中尚未明确乳糖、果糖、葡萄糖含量的测定方法，食品安全国家标准(GB 5009.8-2016《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》)中是将待测样品加入约50mL水溶解，之后缓慢加入乙酸锌和亚铁氰化钾溶液各5mL，加水定容至100mL，磁力搅拌或超声30min，过滤后进行液相色谱分析。另外，NY/T 1422-2007《乳及乳制品中乳糖的测定酶-比色法》是通过将乳糖酶解后采用分光光度法测定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的含量，来间接测定乳糖含量，该方法不仅操作繁琐，并且其酶解反应步骤多，需要控制的条件较多，实验人员操作误差来源也多，因而在实际应用中重复性较差，且不能实现对乳糖、果糖、葡萄糖含量的同时分离和检测。

因此，现有技术中对乳糖、果糖、葡萄糖含量的检测方法主要存在以下不足之处：

(1)前处理过程繁琐，耗时长，需配置试剂较多；

(2)提取温度不确定，难以将试样中的乳糖、果糖、葡萄糖提取充分；

(3)乙酸锌和亚铁氰化钾在实验操作过程中易刺激眼睛、呼吸系统和皮肤，对实验人员存在一定的安全风险，且亚铁氰化钾对环境有严重危害；

(4)食品中的组分较为单一，而饲料组分复杂，亚铁氰化钾配合乙酸锌作为澄清剂并不适用于蛋白质含量低的样液澄清，吸附干扰物质的效果不突出，无法达到预期的实验效果。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种测定饲料中乳糖、果糖、葡萄糖含量的方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种测定饲料中乳糖、果糖、葡萄糖含量的方法，该方法包括以下步骤：

1)将饲料分散于水中，先进行恒温水浴提取，再进行超声提取；

2)加入三氯乙酸溶液，静置后离心分离，取上清液作为待测液；

3)采用高效液相色谱对待测液进行检测。

进一步地，所述的饲料为乳清粉或乳猪配合饲料。乳清粉中主要含有乳糖，乳猪配合饲料中可能同时含有乳糖、果糖、葡萄糖。

进一步地，步骤1)中所述的恒温水浴提取过程中，提取温度为80-90℃，提取时间为8-12min。