[发明专利]一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法

说明书

本发明公开了一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法，属于植物繁殖育苗技术领域，该方法包括：种子处理：取云南大叶种茶树种子，清洗种子，酒精浸泡，氯化汞消毒，无菌水冲洗干净；愈伤组织培养：剥开外种皮，取出未成熟胚，接种于愈伤组织培养基上，愈伤组织培养；30d后转入发芽培养基，发芽培养；生根培养：待苗高2.5‑3.5cm时，切下并移入生根培养基，生根培养；炼苗、移苗：待根长出3条以上，根长超过1cm时，打开培养箱盖，炼苗3‑5d后取出小苗，清洗根部，移栽至盛有灭过菌的蛭石的营养钵中，用塑料膜罩住小苗3‑5d，移栽至土中。本发明使云南大叶种茶树的茶苗繁殖时间上缩短一年以上，劳动成本大为减少。

技术领域

本发明涉及植物繁殖育苗技术领域，特别是涉及一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法。

背景技术

茶树是多年生经济作物，其繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两种。其中，有性繁殖是将茶树种子直播来进行繁殖，其优点是适应环境能力强、种苗成本低，但是其缺点是植株间经济性状混杂，生长差异大，生育期不一致，不便管理，尤其是一些结实率低的茶树品种难以用种子繁殖。由于无性繁殖能保持良种的特征特性，后代性状一致性高，有利于茶园管理，近年来备受人们关注，但是目前传统的无性繁殖方法在茶树的生根效果和成活率方面均不理想。

水培扦插繁殖技术作为无性繁殖方法中的一种，是目前常用的茶树繁殖方法，其是以水作基质，利用离体植物组织器官的再生性能，在一定条件下经人工培育使其发育成为一个独立植物体的育苗方法。然而传统的水培扦插繁殖方法受到温度、水质、光照等因素的影响，普遍存在发根速度慢、成活率低等缺陷。如中国专利申请号为201310110582.4公开了一种茶树的水培-土培扦插快速育苗方法，其工艺路线如下：温室、网室准备，配制营养液，采穗、剪穗，插穗剪口消毒灭菌，激素处理，温室扦插，温室水培，配制营养土钵，转苗扦插，网室土培生根，插穗成茶苗，炼苗至成苗。虽然上述专利通过将水培温室温度控制在25～30℃，在一定程度上促进了生根，但是在该温度下易导致液面上方的嫩芽、嫩叶因失水太快而枯萎。此外，传统扦插繁育要求扦插穗必须是半木质化枝条，因此在扦插前还需要将枝梢上的非木质化部分剪除，直接降低了枝条的利用率。另外，传统扦插繁殖多受到时节的影响，一般选择春夏两季温度较适宜的时节进行，一定程度上也限制了茶树育苗的发展。

组织培养技术在植物种苗繁育中已得到广泛应用，技术也相对成熟。利用组织培养技术繁殖茶树种苗即可克服播种及扦插繁殖中的材料限制，又可在短期内获得大量优良种苗。目前，针对茶树的研究多集中于生物学、生态资源及有效成分分析等领域，而对于茶树种苗组织培养技术的研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法，以解决上述现有技术存在的问题，克服了常规方法繁殖茶树种苗材料紧缺、速度慢等问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法，包括以下步骤：

(1)种子处理：取云南大叶种茶树种子，清洗干净，酒精浸泡，氯化汞消毒，无菌水冲洗干净；

(2)愈伤组织培养：剥开外种皮，取出未成熟胚，接种于愈伤组织培养基上，愈伤组织培养；30d后转入发芽培养基，发芽培养；

(3)生根培养：待苗高2.5-3.5cm时，切下并移入生根培养基，生根培养；

(4)炼苗、移苗：待根长出3条以上，根长超过1cm时，打开培养箱盖，炼苗3-5d后取出小苗，清洗根部，移栽至盛有灭过菌的蛭石的营养钵中，用塑料膜罩住小苗3-5d，移栽至土中。

进一步地，步骤(1)中，所述种子处理的具体步骤为：采用3-5月龄的云南大叶种茶树幼果，充分清洗消毒后剥去果皮，取出尚未成熟的乳白色或略带棕色的种子；用75％酒精浸泡1min，再用0.1％氯化汞消毒15min后用无菌水冲洗5-6次。