[发明专利]一种胎盘组织工程去免疫原皮肤支架及其制备方法

说明书

本发明涉及医用材料技术领域，具体涉及一种胎盘组织工程去免疫原皮肤支架的制备方法。本发明的胎盘组织工程去免疫原皮肤支架的制备方法，包括以下步骤：1)从胎盘中无菌分离出胎盘膜；2)将分离出的胎盘膜清洗后置于抗生素溶液中浸泡，进行消毒处理；3)反复用无菌蒸馏水冲洗浸泡胎盘；4)将消毒后的胎盘膜用不同浓度的乙醇‑生理盐水溶液中梯度脱水，去除蛋白，灭活免疫原；5)将脱水后的胎盘膜浸泡于乙醇中，浸泡后取出风干，制成皮肤支架。本发明能够实现简便，快速，高效，大规模制备医用人工皮肤的目的，且易于保存，便于运输。

技术领域

本发明涉及医用材料技术领域，具体地，涉及一种胎盘组织工程去免疫原皮肤支架及其制备方法。

背景技术

胎盘(placenta)是胎儿与母体之间物质交换的重要器官，是人类妊娠期间由胚胎胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间组织结合器官。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还合成多种激素、酶和细胞因子等，以维持正常妊娠。胎盘还是一味中药，称之为紫河车，又叫人胎衣、胞衣、衣胞、胎膜。自古以来，胎盘被医者认为是一种良药，可以增强免疫系统而被广泛应用，且其在安全方面更加可靠。

围产期废弃的胎盘组织是重要的再生医学种子细胞来源之一，其来源广泛、易于获取且无伦理道德争议，是近年的研究热点。胎盘作为一种免疫豁免生物移植物，具有抗炎、抗粘连，减轻疼痛，促进上皮化等生物学特性，近年来，随着对胎盘的进一步认知及胎盘保存制备技术的发展，胎盘再次成为研究及应用的热点，被广泛应用于烧伤救治等领域。由此可以看出人胎盘为创伤修复组织工程材料有良好的应用前景。

目前类似研究多使用羊膜为皮肤支架基质材料，但羊膜质地轻薄，拉伸过程易破损。本发明应用胎盘制作皮肤支架，与已有发明所使用的材质(羊膜组织成分)，及相关处理工艺均存在本质不同，自古以来“紫河车”的入药成分为胎盘而非羊膜，现代研究表面胎盘中存在多种激素及免疫因子，有助于局部损伤组织再生(羊膜皮肤支架无此功能)。此外，胎盘皮肤支架产量远高于羊膜皮肤支架(羊膜仅为胎盘内侧一层薄膜结缔组织，做成支架后仅能起到破损组织表面覆盖作用)，本工艺处理后获得的胎盘皮肤支架韧性极佳，相比以往报道中的羊膜支架，拉伸及延展性能显著提升，实际治疗应用中能够依据烧伤创面大小及形状进行任意延展，更加便捷。因此，本发明无论在支架选材还是工艺流程方面均为原创性发明。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，公开了一种人来源的胎盘组织工程去免疫原皮肤支架的制备方法，该方法能够实现简便，快速，高效，大规模制备医用人工皮肤的目的，且易于保存，便于运输。

本发明的具体技术方案如下：

本发明的胎盘组织工程去免疫原皮肤支架的制备方法，包括以下步骤：

1)取产后弃用胎盘组织，用无菌蒸馏水冲洗胎盘、去绒毛、血管和羊膜及其它结缔组织，制备无菌胎盘膜；

2)将分离出的胎盘膜清洗后置于无菌抗生素-生理盐水溶液中浸泡，抗菌处理；

3)将处理后的胎盘膜用不同浓度的乙醇-生理盐水溶液中梯度脱水，去除蛋白，灭活免疫原；

4)将脱水后的胎盘膜浸泡于无菌抗生素-生理盐水溶液中，随后取出风干，制成皮肤支架。

根据本发明所述的制备方法，其中优选地，所述抗生素溶液为含有抗生素的无菌生理盐水溶液。

根据本发明所述的制备方法，其中优选地，步骤2)所述的抗生素为庆大霉素、青霉素和链霉素中的一种或几种。进一步优选地，可以是庆大霉素，防止青霉素过敏、链霉素毒性反应。

根据本发明所述的制备方法，其中优选地，步骤2)使用生理盐水清洗分离出的胎盘膜，清洗后置于抗生素溶液中浸泡5-24小时。

根据本发明所述的制备方法，其中优选地，步骤3)所述不同乙醇-生理盐水溶液中的乙醇浓度分别为75％、35％、15％。