[发明专利]一种靶向NKG2D配体和CD19的双靶点嵌合抗原受体及其表达载体和应用

权利要求书

1.一种靶向NKG2D配体和CD19的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述双靶点嵌合抗原受体包括：依次连接的信号肽、靶向NKG2D配体的NKG2D胞外区、连接片段、靶向CD19的单链抗体、加长的CD8α铰链区、跨膜区、共刺激因子和胞内信号肽，所述信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，所述靶向NKG2D配体的NKG2D胞外区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示，所述靶向CD19的单链抗体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示，所述加长的CD8α铰链区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：4所示，所述跨膜区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：5所示，所述胞内信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ IDNO：6所示。

2.根据权利要求1所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述共刺激因子包括：CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、ICOS、NKG2D和B7-H3中的至少一种。

3. 根据权利要求2所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述共刺激因子为4-1BB，且所述共刺激因子的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：7所示。

4.根据权利要求1所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述连接片段为(G4S)n或(EAAAK)n，n为1、2或3。

5. 根据权利要求4所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述连接片段为(G4S)n，n为1，所述连接序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：8所示。

6.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括载体和如权利要求1～5任一项所述的双靶点嵌合体抗原受体。

7.根据权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述载体为慢病毒载体、逆转录病毒载体、电转导载体或睡美人转座子载体。

8.一种如权利要求6或7所述的表达载体在制备药物中的应用，其特征在于，所述应用包括：将所述表达载体作为抗B细胞系恶性血液肿瘤的药物。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述抗B细胞系恶性血液肿瘤包括：非霍奇金淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞急性淋巴细胞白血病和弥漫性大B细胞淋巴瘤。