[发明专利]一种具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统及控制方法有效
申请号: | 201911349859.2 | 申请日: | 2019-12-24 |
公开(公告)号: | CN110975960B | 公开(公告)日: | 2022-05-24 |
发明(设计)人: | 吴文明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所 |
主分类号: | B01L7/00 | 分类号: | B01L7/00;B01L9/00;B01L3/02;C12M1/00;C12M1/38;C12M1/34 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 徐丽 |
地址: | 130033 吉林省长春市*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 dpcr qpcr 功能 复合型 pcr 系统 控制 方法 | ||
1.一种具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,包括:
基座(1);
芯片放置台(3),用以放置芯片(2);
解旋恒温热源(4),用以加热所述芯片(2)实现DNA双链解旋;
退火恒温热源(5),用以对所述芯片(2)进行低温退火及适温延伸以实现引物与单链核酸模板结合及核苷酸在互补链的延伸增长;
热源放置架(6),用以放置所述解旋恒温热源(4)及所述退火恒温热源(5);
X-Y轴双向滑台(7),安装于所述基座(1),用以驱动所述芯片放置台(3)及所述热源放置架(6)沿X向和Y向运动;
照相机(8),用以定时对所述芯片(2)进行拍照,包括同轴光源结构,包含一个激光器,一片平面均化片,一片滤波片,一块分光镜和镜筒,平面均化片将圆形激光光源扩成方形光斑,激光遇到分光镜发生反射,从而使激光均匀的照射在芯片(2)上,受到激光激发的荧光穿过分光镜,经过滤光片到达CMOS镜头中,进而被照相机(8)捕获;
激光源和光源(12),用以补充光源;
控制器(9),用以控制所述X-Y轴双向滑台(7)、所述解旋恒温热源(4)、所述退火恒温热源(5)及所述照相机(8)定时运行。
2.根据权利要求1所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,所述X-Y轴双向滑台(7)包括X向滚珠丝杠、用以驱动所述X向滚珠丝杠运行的X向步进电机、Y向滚珠丝杠和用以驱动所述Y向滚珠丝杠运行的Y向步进电机,所述X向滚珠丝杠和所述Y向滚珠丝杠上各安装有放置平台。
3.根据权利要求2所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,还包括:
恒温加热热源(10),置于所述热源放置架(6)、用以将所述芯片(2)快速加热至解旋温度;
恒温制冷热源(11),置于所述热源放置架(6),用以将所述芯片(2)快速降低至退火温度。
4.根据权利要求3所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,还包括围设于所述解旋恒温热源(4)、所述退火恒温热源(5)、所述恒温加热热源(10)及所述恒温制冷热源(11)的底部及四周的保温部件。
5.根据权利要求4所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,还包括用以容纳所述基座(1)的保温盒。
6.根据权利要求5所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,所述解旋恒温热源(4)、所述退火恒温热源(5)、所述恒温加热热源(10)及所述恒温制冷热源(11)可以为加热片或者恒温TEC设备。
7.根据权利要求1~6任一项所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,所述芯片(2)可以为微点阵列芯片;或者所述芯片(2)设有液滴生成流道,所述液滴生成流道为Y型、T型或者十字型。
8.一种具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统的控制方法,应用于上述权利要求1~7任一项所述的具有dPCR与qPCR功能的复合型PCR系统,其特征在于,包括如下步骤:
利用X-Y轴双向滑台(7)平移热源放置架(6)或者芯片放置台(3),以使解旋恒温热源(4)对芯片(2)进行加热和保温,实现DNA双链解旋;
利用所述X-Y轴双向滑台(7)机械式平移,以使所述芯片(2)在室温下冷却至退火温度;
利用所述X-Y轴双向滑台(7)机械式平移,以使退火恒温热源(5)对所述芯片(2)进行保温,实现碱基配对和延伸;
由控制器(9)控制照相机(8)对所述芯片(2)进行拍照;
重复上述步骤;
分析各照片中荧光亮度,绘制荧光亮度曲线。
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