[发明专利]一种T细胞增殖方法及其用途

说明书

本发明涉及一种T细胞增殖方法及其用途，属于生物医学领域。所述方法包括：获取细胞纤维丝，所述细胞纤维丝包含内芯和包裹所述内芯的纤维外层；其中，所述内芯源自于含有T细胞的细胞悬液，所述纤维外层源自于高分子材料；对所述细胞纤维丝进行培养，获取含有纤维外层的所述T细胞。本发明提供的T细胞增殖方法，提高了T细胞体外增殖的能力，并且提高了T细胞生存率，为体外培养T细胞提供了新思路，为过继性免疫治疗提供新的细胞培养方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域或生物三维打印领域，具体涉及一种三维生物打印的T细胞增殖方法及其用途。

背景技术

同轴挤出式生物打印是构建模拟细胞三维微环境的一种新颖方法。同轴通道可有多层，制造出由多种材料和细胞共同组成的线样结构。基于同轴打印技术，构建了用于组织工程、药物筛选和组织器官体外模型研究的载细胞的壳-芯结构，使细胞处于三维环境，并由形成“壳”的细胞外基质材料提供相应微环境，使细胞处于与体内相似的微环境中，有利于发挥细胞的生物学功能。

近年来，基于T细胞的免疫治疗在临床治疗中取得了重大突破。国内外很多团队进行的过继性免疫治疗(Adoptive Cell Transfer Therapy，ACT)，是指从肿瘤患者体内分离免疫活性细胞，在体外进行扩增和功能鉴定，然后向患者回输，从而达到直接杀伤肿瘤或激发机体的免疫应答杀伤肿瘤细胞的目的。目前进行较多的是TIL、TCR-T和CAR-T三种过继性免疫疗法，在急性B系淋巴细胞白血病、大B细胞非霍奇金淋巴瘤、难治恶性淋巴瘤等疾病中已有明确的治疗效果，且在一些实体肿瘤，如肝癌、胃癌、神经胶质母细胞瘤患者的临床试验中也有十分可喜的治疗效果。这种疗法目前也存在很多的问题，例如在一些年幼或老年患者及肿瘤高负荷的患者体内很难获得足量的T细胞，且CAR-T细胞制备成本高，生产制备时间长，无法短时间内培养增殖得到足量的T细胞，细胞的衰竭程度偏高及细胞坏死凋亡偏高。

因此，基于现有技术存在的缺陷，现在迫切需要提供一种促进T细胞增殖的方法，使得T细胞能够在体外快速扩增的同时，还能够进一步保证T细胞的存活率。

发明内容

发明要解决的问题

本发明的目的之一在于，提供一种T细胞增殖方法，使得T细胞能够在体外快速扩增的同时，还能够进一步保证T细胞的存活率。

本发明的目的之一还在于，提供一种前述T细胞增殖方法的用途

用于解决问题的方案

本发明涉及的技术方案如下。

(1)一种获取T细胞的方法，包括如下步骤：

获取细胞纤维丝，所述细胞纤维丝包含内芯和包裹所述内芯的纤维外层；其中，所述内芯源自于含有T细胞的细胞悬液；所述纤维外层源自于溶解有高分子材料的溶液，并且具有孔结构；对所述细胞纤维丝进行培养，获取含有纤维外层的所述T细胞。

(2)根据(1)所述方法，其中，所述方法进一步包括如下步骤：

纤维外层溶解步骤：将所述纤维外层进行溶解，获取不含有纤维外层的所述T细胞；

可选的，所述纤维外层溶解步骤中使用的溶解液为柠檬酸-EDTA溶液。

(3)根据(1)-(2)任一项所述方法，其中，所述含有T细胞的细胞悬液中的T细胞是激活的T细胞；可选的，所述激活的T细胞选自以下(i)-(ii)中的至少一种：

(i)所述T细胞通过抗CD3和CD28的抗体刺激被激活；

(ii)所述T细胞通过与包被抗-CD3/CD28的磁珠孵育被激活。

在一个具体的实施方式中，所述细胞悬液中的T细胞来源于外周血单个核细胞。