[发明专利]一种苏木素染液及其制备方法、应用方法

说明书

本发明公开了一种苏木素染液及其制备方法、应用方法，苏木素染液的制备方法包括以下步骤：将80～100份无水乙醇、24～28份冰醋酸和2～4份苏木素混合得到a液；将400～600份蒸馏水和16～22份硫酸铝钾加热混合均匀得到b液；将a液、b液、0.1～0.4份碘酸钠混合均匀，流水冷却至室温，然后加入40～60份甘油，震荡1h后即可。染色方法包括以下步骤：将组织进行冷冻切片，然后置于固定液中固定，将固定好的组织切片水洗；然后采用所述苏木素染液染色，水洗、盐酸乙醇分化、水洗，再用稀氨水返蓝10s、水洗、95wt％乙醇稍洗、无水乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。本发明染色时间只需2～4min，使用方便，染色效果较佳，染色后细胞核呈现鲜蓝色，且鲜明亮丽。

技术领域

本发明涉及了生物技术领域，具体的是一种苏木素染液及其制备方法、应用方法。

背景技术

苏木素是从洋苏木中提取的一种染色剂，它在被氧化后生成苏木精，广泛用于组织切片或培养细胞的染色。苏木素是一种碱性染料，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色，成熟的苏木素染液为紫红色。

苏木素染色是组织切片中最常用的染色方法，苏木素染液的配方甚多，染色效果也有差异，影响染色效果的因素颇多。现有中的苏木素染色液质量参差不齐，且使用方法比较比较繁琐，给使用者造成了较多的不便。

因此，有必要对苏木素染液的配方以及染色方法进行进一步的改进，以能够达到更好的染色效果并且同时染色方便。

发明内容

为了克服现有技术中的缺陷，本发明实施例提供了一种苏木素染液及其制备方法、应用方法，其染色时间只需2～4min，使用方便，染色效果较佳，染色后细胞核呈现鲜蓝色，且鲜明亮丽。

本发明公开了一种苏木素染液，以重量份计，包括以下成分：

苏木素2～4份、

无水乙醇80～100份、

硫酸铝钾16～22份、

碘酸钠0.1～0.4份、

冰醋酸24～28份、

蒸馏水400～600份。

作为优选，所述苏木素染液成分中还包括40～60份甘油。

本发明还公开了一种苏木素染液的制备方法，包括以下制备步骤：

步骤一：将80～100份无水乙醇、24～28份冰醋酸和2～4份苏木素混合得到a液；

步骤二：将400～600份蒸馏水和16～22份硫酸铝钾加热混合均匀得到b液；

步骤三：将步骤一中a液、步骤二中b液、0.1～0.4份碘酸钠混合均匀，流水冷却至室温，然后加入40～60份甘油，震荡1h后即可。

作为优选，步骤二中加热混合的温度为90℃～95℃。

本发明同时公开了一种染色方法，其采用如权利要求1或2所述的苏木素染液，包括以下步骤：

步骤一：将组织进行冷冻切片，然后置于固定液中进行固定，将固定好的组织切片水洗以去除多余固定液；

步骤二：将步骤一中水洗后的组织切片采用所述苏木素染液染色，染色后水洗；

步骤三：将步骤二中水洗后的组织切片用盐酸乙醇分化，然后水洗；

步骤四：将步骤三中水洗后的组织切片用稀氨水返蓝10s，返蓝后水洗；

步骤五：将步骤四中水洗后的组织切片用95wt％乙醇稍洗，然后用无水乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。

作为优选，步骤二中苏木素染液的染色时间为2～4min。