[发明专利]一种分离的核酸分子及其应用

权利要求书

1.分离的核酸分子，其以5’至3’方向包含肝脏特异性表达调控元件以及与所述肝脏特异性表达调控元件可操作连接的目的基因，其中与使用核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示的表达调控元件相比，所述肝脏特异性表达调控元件使得所述目的基因在肝脏或肝细胞中的表达量增加至少100％。

2.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，其中所述肝脏特异性表达调控元件包含：

a)源自狗serpinA1基因的启动子或其功能性片段；

b)源自爪蟾卵黄蛋白原A2基因的启动子或其功能性片段；

c)源自爪蟾白蛋白基因的启动子或其功能性片段；以及

d)源自人serpinA1基因的启动子或其功能性片段。

3.根据权利要求2所述的分离的核酸分子，其中所述源自狗serpinA1基因的启动子或其功能性片段包含SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。

4.根据权利要求2-3中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述源自爪蟾卵黄蛋白原A2基因的启动子或其功能性片段包含SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述源自爪蟾白蛋白基因的启动子或其功能性片段包含SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列。

6.根据权利要求2-5中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述源自人serpinA1基因的启动子或其功能性片段包含SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列。

7.根据权利要求2-6中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述肝脏特异性表达调控元件以5’至3’的方向依次包含：所述源自狗serpinA1基因的启动子或其功能性片段，所述源自爪蟾卵黄蛋白原A2基因的启动子或其功能性片段，所述源自爪蟾白蛋白基因的启动子或其功能性片段和所述源自人serpinA1基因的启动子或其功能性片段。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的分离的核酸分子，其还包含内含子，所述内含子位于所述肝脏特异性表达调控元件和所述目的基因之间。

9.根据权利要求8所述的分离的核酸分子，其中所述内含子为SV40内含子或MVM内含子。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的分离的核酸分子，其还包含多聚腺苷酸信号序列，所述多聚腺苷酸信号序列位于所述目的基因的3’端。

11.根据权利要求10所述的分离的核酸分子，其中所述多聚腺苷酸信号序列为BGH-polyA信号序列或SV40 polyA信号序列。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的分离的核酸分子，其还包含Kozac序列，所述Kozac序列位于所述肝脏特异性表达调控元件和所述目的基因之间。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的分离的核酸分子，其以5’至3‘方向依次包含：所述肝脏特异性表达调控元件，所述内含子，所述Kozac序列，所述目的基因，以及所述多聚腺苷酸信号序列。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述目的基因编码目的蛋白质，且所述目的蛋白质包括报告蛋白质、治疗性蛋白质和/或预防性蛋白质。

15.根据权利要求14所述的分离的核酸分子，其中所述目的蛋白质包括sfGFP和萤火虫荧光素酶。

16.根据权利要求14-15中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述目的蛋白质包含SEQ ID NO:8和10中任一项所示的氨基酸序列。