[发明专利]一种大鼠眼球组织细胞固定液及其制备方法、应用方法

说明书

本发明公开了一种组织细胞固定液及其制备方法、应用方法，以重量份计，包括以下成分：甲醛28～36份、乙二醇1～2份、山梨醇1～4份、异丁醇2～3份、高碳醇7～9份、NaH₂PO₄·2H₂O 2.5～3.6份、Na₂HPO₄·12H₂O 8.2～9.3份、H₂O 400～500份。组织细胞固定液制备方法包括以下步骤：将2.5～3.6份NaH₂PO₄·2H₂O、8.2～9.3份Na₂HPO₄·12H₂O与400～500份H₂O混合成a液；取所述a液总量的四分之三与28～36份甲醛混合成b液；取所述a液总量的四分之一与1～2份乙二醇、1～4份山梨醇、2～3份异丁醇以及7～9份高碳醇混合成c液；将b液以及c液混合均匀，得到所述组织细胞固定液。本发明组织细胞固定液能够很好的保持组织细胞的固有形态，并且更加环保。

技术领域

本发明涉及了生物技术领域，具体的是一种大鼠眼球组织细胞固定液及其制备方法、应用方法。

背景技术

为了防止组织细胞的死后变化，防止组织细胞的自溶和腐败，保持组织细胞的固有形态。通常需要用到组织细胞固定液。

组织细胞固定液能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长以使组织细胞保持固有形态。

传统的组织细胞固定液一般采用醛类物质。醛类物质的使用对环境及操作人员的健康造成不利影响。

因此，需要对现有的组织细胞固定液进行进一步的改进，以使其在保持较好固定作用的基础上，还能更加环保。

发明内容

为了克服现有技术中的缺陷，本发明实施例提供了一种大鼠眼球组织细胞固定液及其制备方法、应用方法，其能够很好的保持组织细胞的固有形态，并且更加环保。

本发明公开了一种组织细胞固定液，以重量份计，包括以下成分：

甲醛28～36份、

乙二醇1～2份、

山梨醇1～4份、

异丁醇2～3份、

高碳醇7～9份、

NaH₂PO₄·2H₂O 2.5～3.6份、

Na₂HPO₄·12H₂O 8.2～9.3份、

H₂O 400～500份。

所述高碳醇的制备方法包括以下步骤：

将司盘80和吐温60复配成HLB值为13～16乳化剂；

将0.5份硬脂酸、0.5份甘油、1.5份聚乙烯醇、4份单硬脂酸乙二醇酯，2份十四醇以及5份石蜡混合均匀得到油相；

将0.2份氢氧化钠和30份去离子水混合均匀得到水相；

将所述乳化剂、所述油相以及所述水相加入三颈瓶中搅拌反应，即得所述高碳醇。

作为优选，所述搅拌反应的温度为80～90℃，反应时间为40～60min。

本发明还提供了一种组织细胞固定液的制备方法，包括以下步骤：