[发明专利]利用重组谷氨酸棒杆菌代谢甘露醇合成L-鸟氨酸的方法

权利要求书

1.利用重组谷氨酸棒杆菌代谢甘露醇合成L-鸟氨酸的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）重组谷氨酸棒杆菌：构建含有敲除负调控蛋白MtlR同源上下臂的重组质粒，导入谷氨酸棒杆菌，敲除负调控蛋白MtlR的编码基因mtlR；然后将强启动子为P_NCgl0824启动子插入在mtlD基因上游非编码区，强化表达甘露醇脱氢酶的编码基因mtlD，获得重组谷氨酸棒杆菌；

（2）好氧发酵合成L-鸟氨酸：将步骤（1）中获得的重组谷氨酸棒杆菌接种于发酵培养基中进行好氧发酵合成L-鸟氨酸，谷氨酸棒杆菌的接种量为1-20体积％，发酵温度为30℃；控制摇床转速为250 rpm，发酵时间：72 h；发酵结束后收集发酵液，对所述发酵液的OD₆₀₀测定与L-鸟氨酸浓度测定；

所述发酵培养基包含甘露醇、玉米浆、硫酸铵、MgSO₄、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、K₂HPO₄、MnSO₄、FeSO₄、CaCO₃。

2.根据权利要求1所述利用重组谷氨酸棒杆菌代谢甘露醇合成L-鸟氨酸的方法，其特征在于所述发酵培养基中各组分的含量为：甘露醇 20-100 g/L、玉米浆 5-25 g/L、硫酸铵10-60g/L、MgSO₄ 0.2-5 g/L、KH₂PO₄ 0.5-5 g/L、Na₂HPO₄ 0.5-5 g/L、K₂HPO₄ 0.5-5 g/L、MnSO₄ 0.001-1 g/L、FeSO₄ 0.001-1 g/L、CaCO₃ 10-30 g/L。

3.根据权利要求1所述利用重组谷氨酸棒杆菌代谢甘露醇合成L-鸟氨酸的方法，其特征在于所述发酵培养基中各组分的含量为：甘露醇80 g/L、玉米浆20 g/L、硫酸铵50g/L、MgSO₄2.5 g/L、KH₂PO₄1 g/L、Na₂HPO₄ 0.5 g/L、K₂HPO₄0.5 g/L、MnSO₄0.02 g/L、FeSO₄ 0.02g/L、CaCO₃ 10 g/L。