[发明专利]一种通用型病毒样本保存缓冲液及其制备方法有效
申请号: | 201911327781.4 | 申请日: | 2019-12-20 |
公开(公告)号: | CN110938603B | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 施凯升;李兴祥;谈翼辰;秦爱清;王瑶;程俊雨;林学祥;曾雨辉;肖鑫;刘子睿;吴婷婷;刘志宇;陈鑫 | 申请(专利权)人: | 阿吉安(福州)基因医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12N1/04 |
代理公司: | 福州市博深专利事务所(普通合伙) 35214 | 代理人: | 张明 |
地址: | 350000 福建省福州市高*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通用型 病毒 样本 保存 缓冲液 及其 制备 方法 | ||
本发明公开了生物试剂相关技术领域的一种通用型病毒样本保存缓冲液及其制备方法,包括以下组分:无RN酶纯水、六水氯化镁、二水氯化钙、咪唑、曲拉通X‑100、液体生物防腐剂Proclin 300和pH值调节剂;是一种通用型病毒样本保存缓冲液,既能适用于PCR方法或其他分子检测方法的使用,又能适用于病毒抗原或抗体的检测,具有更好的维持病毒完整性的能力,可适用于核酸、抗体抗原或功能酶的保存;保存的样本,可直接用于PCR、ElISA或胶体金、荧光等其他检测方法的使用。
技术领域
本发明涉及生物试剂相关技术领域,特别涉及一种通用型病毒样本保存缓冲液及其制备方法。
背景技术
一直以来,病毒感染时常侵袭着人类的健康,也是目前传染性疾病,甚至导致疾病大流行的主要原因之一。因此,病毒的研究,是现代医学发展的一大热点。现有技术中,病毒提取,病毒培养,甚至病毒的检测与鉴别方面的研究都有着长足的进步。但是,现有技术还存在比较多的技术问题等待研究,例如,从样本中提取出的病毒,大部分并不稳定,需要借助一些辅助工具来维持病毒长期的活性稳定,这就对病毒样本保存缓冲液的技术效果提出更高的要求。理想的病毒样本保存液需要能够较好地稳定病毒,并且能够方便病毒样本的运输和进一步的研究使用。然而,病毒的繁殖与变异速度较快,要维持病毒样本的稳定性,病毒样本保存缓冲液起着至关重要的作用。
现有技术中常见的病毒样本保存缓冲液的设计或针对于核酸的保护,会指向病毒功能蛋白的保护。例如针对核酸的样本保存缓冲液中,通常含有DNase/RNase和其他功能酶的抑制作用,破坏功能蛋白,而主要保护功能蛋白的病毒样本保存缓冲液,对于核酸的保护效果又不佳。第一类病毒样本保存缓冲液更适用于PCR方法或其他分子检测方法的使用,而第二类病毒样本保存缓冲液更适用于病毒抗原或抗体的检测,比如ElISA或胶体金、荧光等快速检测的使用。但是,现有技术中缺乏一种通用型的病毒样本保存缓冲液,能够适应上述两类病毒样本保存的需求。
发明内容
针对现有技术存在的缺乏一种通用型的病毒样本保存缓冲液,能够适应上述两类病毒样本保存的需求的技术问题,本发明提供一种通用型病毒样本保存缓冲液及其制备方法。
为实现上述目的,本发明的技术方案为:
一种通用型病毒样本保存缓冲液,包括以下组分:无RNA酶纯水、六水氯化镁、二水氯化钙、咪唑、曲拉通X-100、液体生物防腐剂Proclin 300和pH值调节剂。
进一步的,包括按重量份计的以下的组分:900~1100份无RNA酶纯水、1.44~1.76份六水氯化镁、5.94~7.26份二水氯化钙和3.06~3.74份咪唑;还包括按体积份计的以下组分:4.5~5.5份曲拉通X-100和0.9~1.1份液体生物防腐剂Proclin300;其中,1重量份所述无RNA酶纯水换算成体积份计为1体积份;所述通用型病毒样本保存缓冲液的pH值为6.8~7.4。
优选的,包括以下用量的组分:包括按重量份计的以下的组分:1000份无RNA酶纯水、1.6份六水氯化镁、6.6份二水氯化钙和3.4份咪唑;还包括按体积份计的以下组分:5.0份曲拉通X-100和1.0份液体生物防腐剂Proclin300;其中,1重量份所述无RNA酶纯水换算成体积份计为1体积份;所述通用型病毒样本保存缓冲液的pH值为7.0~7.2。
优选的,所述pH值调节剂为6N盐酸和/或5N氢氧化钠溶液。
优选的,所述通用型病毒样本保存缓冲液的保存温度为2~8℃。
一种上述任一项所述的通用型病毒样本保存缓冲液的制备方法,包括以下步骤:
S1)准确称量所述无RNA酶纯水,并将所述无RNA酶纯水分成第一无RNA酶纯水和第二无RNA酶纯水,其中,所述第一无RNA酶纯水的量为所述无RNA酶纯水总用量的60~80%;
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