[发明专利]一种以茶叶为原料制备小分子肽的方法

说明书

本发明涉及分子肽制作技术领域，具体是一种以茶叶为原料制备小分子肽的方法，包括如下步骤：1)冷冻处理；2)电磁波溶胀；3)真空挤压膨化；4)酶解；5)高压均质；本发明方法具有酶解效率高，分子肽提取率高、酶解时间短，分子肽纯度好，小分子肽的生物活性、生物相容性等得到有效保障，茶叶资源得到充分利用。

技术领域

本发明涉及分子肽制作技术领域，具体是一种以茶叶为原料制备小分子肽的方法。

背景技术

茶叶中富含茶多酚、茶多酚、茶多糖、蛋白质、纤维素类等成分，均发挥不同的药用价值，如生津止渴、清凉降火、抗氧化、调节血脂等。有的研宄表明，茶叶中蛋白质含量约15％～30％(以干重计算)，其中约80％为谷蛋白，14％为醇溶蛋白，3.5％为白蛋白和约1％为球蛋白，大部分呈水难溶的状态，因此，传统茶叶的使用方法不能够使得茶叶蛋白充分溶出，虽然近些年的研宄相继报道茶叶蛋白的生物活性主要有抗氧化、抗诱变等，报道茶叶蛋白的种类主要有糖蛋白、多酚氧化酶等，但分子量大或者以多聚体状态存在，这使得茶叶蛋白的吸收利用率低。

小分子肽是由两个及以上的氨基酸以肽键相连的一种蛋白质片段，具有易吸收的特点，小分子肽早已成为药食品、保健品、日用化妆品等领域的开发热点。如专利号CN201710695843.1公开了一种石斛小分子肽及其制备方法，采用木聚糖酶、纤维素酶、碱性蛋白酶以及植物蛋白酶进行复合生物酶切的方式提取小分子肽；又如专利号CN201811609136.7公开了一种仿生法制备功能性蛋白多肽的方法，以天然植物蛋白为原料，利用非动物源性蛋白酶，模拟动物消化过程，生产酶解蛋白多肽。包括：将植物蛋白原料预粉碎，加水调制，采用非动物源性复合蛋白酶A、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶进行一次酶解，再加入复合蛋白酶B、赖氨酸氨肽酶和羧肽酶进行二次酶解，制得二次酶解蛋白浆液，然后均质、喷雾干燥、灭菌，即得；但关于茶叶蛋白制备小分子肽的研究鲜见，并且茶叶蛋白中连接键种类报道较少，以及多肽发生自组装的影响因子通常有温度、pH、离子强度、反应时间等，而酶解过程中液伴随着上述影响因子的变化，这使得小分子肽的生物活性、生物相容性等受到抑制，造成酶解时间长、提取率低、稳定性不理想。

鉴于夏秋茶供求量大，造成茶渣增多以及秋冬季茶园修剪的遗弃茶叶也较多，研究和开发茶叶蛋白质资源具有重要的现实意义。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种以茶叶为原料制备小分子肽的方法，具体如下：

一种以茶叶为原料制备小分子肽的方法，包括如下步骤：

1)冷冻处理：将茶叶与改性β-环糊精按质量比10：(0.03～0.07) 的比例混合后，置于温度-17～-9℃条件下冷冻存储20～30min；

2)电磁波溶胀：将步骤1)所得物与矿物质溶液按质量比1：(2～ 4)的比例混合后，进行电磁波溶胀处理15～25min；

3)真空挤压膨化：将步骤2)所得物经真空挤压膨化处理10～ 20min后，在3～5min内冷却至室温，然后研磨至过80目筛；

4)酶解：将步骤3)所得物与去离子水按质量比1：(5～7)的比例混合后，加入茶叶重量0.01～0.05％的复合酶进行酶解，过滤，取滤液；

5)高压均质：滤液在75～95MPa条件下均质处理后，冷冻干燥，即得小分子肽。

本发明中茶叶为采摘后的鲜叶、茶园修剪的遗弃茶叶、浸泡后遗弃茶叶中的任意一种或几种。

所述改性β-环糊精的制备方法为：取3gβ-环糊精，用去离子水定容至100mL，然后加入20mg维生素E，在温度为45～55℃条件下磁力搅拌20～30min后，再置于70～80℃条件下干燥。

所述矿物质溶液由如下质量百分数组分组成：海藻酸钠11～ 17％、酒石酸7～13％、磷酸三钠14～22％，余量为水。