[发明专利]一种人工神经移植物及制备方法

权利要求书

1.一种人工神经移植物的制备方法，其特征在于，包括：

(1)取一定质量的可降解聚酯，溶于有机溶剂中，搅拌1～2天使其充分溶解，制得聚酯溶液；

(2)将聚酯溶液转移至注射器中，并安置于注射泵上，进行静电纺丝加工得到神经套管；

(3)静电纺丝加工结束之后，将神经套管裁剪为长度5～60mm；

(4)取一定质量去细胞基质粉末，加入pH为2的盐酸溶液中，其浓度为0.5％～2％w/v，加入胃蛋白酶，其与去细胞基质的质量比为1:10，25℃下搅拌8～48h，放入超高速离心机以温度4℃，转速10000～40000rpm超速离心30～60分钟，吸取上层溶液，制得去细胞基质消化液；

(5)使用0.1mol/L的NaOH溶液将去细胞基质消化液的pH调至8.0，加0.1mol/L的HCl溶液调pH至7.4，放置在4℃环境下备用，在4℃环境下加入10×PBS溶液，其体积为上述调节pH后的去细胞基质消化液体积的1/9，制得去细胞基质溶胶，在4℃环境下加入PBS溶液，将去细胞基质溶胶稀释至去细胞基质最终浓度0.2～1％w/v；

(6)使用灌注设备在4℃环境下将去细胞基质溶胶灌注到神经套管中；

(7)将灌注有去细胞基质溶胶的神经套管置于37℃环境下10～30分钟，使去细胞基质自组装发生溶胶-凝胶转变，制得去细胞基质凝胶；

(8)去细胞基质凝胶的定向冷冻结晶，将灌注有去细胞基质凝胶的神经套管置入特氟龙管腔中，其中神经套管方向与特氟龙管腔方向一致，其下端与一个铜制导热装置接触，铜制导热装置的下端插入一个冷源装置中，冷源装置提供-196℃至-20℃的温度，去细胞基质中的液态水分子在冷源的定向传导作用下发生定向结晶，整个定向冷冻过程持续30～60分钟；

(9)将经定向冷冻结晶的去细胞基质及神经套管置于冻干机中冻干，其中冻干温度-60℃到0℃，冻干时间24～48h，最终制得人工神经移植物。

2.根据权利要求1所述的人工神经移植物的制备方法，其特征在于，在步骤一中，可降解聚酯包括聚乳酸，聚乳酸-三亚甲基碳酸酯(P(LA-TMC))，聚乙醇酸，聚(D,L-乳酸-co-乙醇酸)，聚(D,L-乳酸-co-己内酯)，聚(D,L-乳酸-co-三亚甲基碳酸酯)，有机溶剂包括2,2,2-三氟乙醇，六氟异丙醇，氯仿，二氯甲烷。

3.根据权利要求1所述的人工神经移植物的制备方法，其特征在于，在步骤二中，聚酯溶液的注射速率为0.5～4mL /h；注射器的注射针头内径为0.20～1.60mm，注射针头所接电压为5～20kV ，其以2～5cm/s的速率进行左右往复扫描；接收器位于注射针头下方，为一个旋转的金属圆棒，其直径为0.5～10mm，旋转速率为60～500rpm，且其连接一个高压电源，电压为0～-3kV 。

4.根据权利要求1所述的人工神经移植物的制备方法，其特征在于，在步骤四中，去细胞基质的来源包括人、猪、牛的脑、脊髓、皮肤、小肠粘膜下层、脂肪。

5.一种人工神经移植物，其特征在于，通过权利要求1-4任意一项所述的人工神经移植物的制备方法制备而成。