[发明专利]四个novel circRNA联合检测食管癌的试剂盒的制备方法

说明书

本发明公开了一种四个novel circRNA联合检测食管癌的试剂盒的制备方法，所述四个novel circRNA，其序列分别见SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示。检测四种novel circRNA_1、2、3和4四个基因在食管癌患者和正常人血液中的表达情况，并在组织中得以验证，通过荧光定量PCR最佳体系实现对novel circRNA_1、2、3和4基因的检测，结果显示novel circRNA_1、2、3、4的联合检测具有诊断意义，能够用于食管癌诊断、治疗效果评估或预后情况评估。

技术领域

本发明属于分子诊断技术领域，具体涉及四个novel circRNA联合检测食管癌的试剂盒的制备方法。

背景技术

食管癌(esophageal cancer,EC)是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，是指原发于食管上皮的恶性肿瘤。我国是食管癌高发国家，发病率排全球前五，远高于亚洲和世界平均水平。虽然我国多年以来一直非常重视食管癌的诊治工作，但90％确诊的EC患者均为中晚期，5年生存率不足20％，相关研究表明，吸烟、饮酒、微量元素缺乏、遗传等因素都与食管癌发病有关。因此，深入了解肿瘤发生发展的分子机制，补充和完善现有的细胞癌变理论体系，有助于为食管癌的防、诊、治提供重要的理论依据。

环状RNA(circRNA)是继小RNA和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)后，RNA家族又一逐渐被人们认识的一种新的内源性非编码RNA，对基因表达的调控起重要作用，成为RNA领域的一个新的研究热点。circRNA的3’和5’末端连接形成共价闭合的环状结构，没有传统线性RNA的5’帽结构及3’多聚腺苷酸尾，该结构使其在细胞内表达较线性RNA更稳定。早在20世纪70年代，Sanger等就发现植物类病毒中存在单链环状RNA，随后又有研究者相继在酵母线粒体等多处中发现circRNA。但由于检测技术的局限性，当时circRNA被认为是外显子转录本发生错误剪接形成的实验干扰产物，并未引起人们重视。

circRNA在基因调控中发挥重要作用，如作为miRNA海绵吸附miRNA、调控相关基因表达、表达多肽等。这些功能使circRNA在肿瘤中的作用受到广泛关注，越来越多的学者致力于circRNA的研究，不断深入探讨其在肿瘤发生发展中的作用机制，力求在肿瘤的诊断和治疗中寻找新的突破。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种四个novel circRNA联合检测食管癌的试剂盒的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种四个novel circRNA联合检测食管癌的试剂盒的制备方法，其中：所述四个novel circRNA，其序列分别见SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示。