[发明专利]一种特异性检测平行构型G-四链体DNA探针的制备方法

权利要求书

1.一种具有双功能检测平行构型G-四链体DNA探针，其特征在于其结构式如下：

。

2.根据权利要求1所述的一种具有双功能检测平行构型G-四链体DNA探针的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：

(1)在氮气保护下，以无水二氯甲烷为溶剂，将醚氧链修饰的对羟基苯甲醛与2,4-二甲基吡咯、2,3-二氯-5,6-二氰基对苯醌、三氟化硼二乙醚、三乙胺按摩尔比为1:2:1:30:35，室温搅拌反应，分离纯化产物，得到化合物3；化合物3的结构式为：

(2)将化合物4、4-氟苯甲醛、碳酸钾按摩尔比1:1:3溶于无水乙腈中，回流反应后，分离纯化产物，得到化合物5；化合物4的结构式为：

化合物5的结构式为：

(3)将化合物3、化合物5、哌啶、冰醋酸按摩尔比为1:1:10:10溶于甲苯中，130℃反应后，分离纯化产物，得到最终的探针化合物；探针化合物的结构式为：

3.利用权利要求1所述的式1的化合物用于制备检测平行构型G-四链体DNA探针的用途，按照下述步骤进行：

1)将具有双功能检测平行构型G-四链体DNA探针用DMSO溶解，再用pH 7.4的缓冲溶液稀释得到溶液B；将待测DNA样品用pH 7.4的缓冲溶液溶解；

2)将溶液B和溶液A混合，使混合液中待测DNA样品与探针的摩尔比2～1，混合溶液用荧光分光光度计或紫外分光光度计分析混合液的光谱变化，判断待测DNA样品是否为平行构型的G-四链体DNA结构；判断方法如下：

(a)用荧光分光光度计分析混合液时，与溶液B相比，若混合液的荧光光谱在606nm处荧光强度明显增强，即增强范围为150～250倍时判定待测DNA样品为平行构型的G-四链体DNA结构；若混合液的荧光强度相对于溶液B没有明显增强，即增强范围小于150倍时判定检测的DNA样品为非平行构型的G-四链体DNA结构；

(b)用紫外分光光度计分析混合液时，与溶液B相比，若混合液的吸收光谱在584nm处有明显的新峰出现，即A:A₀1.05，并且峰宽变窄，判定待测DNA样品为平行构型的G-四链体DNA结构；若混合液的吸收光谱的相对于溶液B没有变化或者发生吸光度降低，即A:A₀1.05，判定检测的DNA样品为非平行构型的G-四链体DNA结构。