[发明专利]一种氨肽酶LapA定点突变蛋白及其应用有效
| 申请号： | 201911308023.8 | 申请日： | 2019-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN111088243B | 公开（公告）日： | 2021-08-24 |
| 发明（设计）人： | 葛宏华;胡馨益;张楠楠;张鹤;陈亚南;后少俊;王方方;魏维;吴亦凡 | 申请（专利权）人： | 安徽大学 |
| 主分类号： | C12N9/48 | 分类号： | C12N9/48;C12N15/57;C12N15/70 |
| 代理公司： | 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 | 代理人： | 洪玲 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 氨肽酶 lapa 定点 突变 蛋白 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种氨肽酶LapA定点突变蛋白，其特征在于，该突变蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一种如权利要求1所述的氨肽酶LapA定点突变蛋白的编码基因，其特征在于，该编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.一种如权利要求1所述的氨肽酶LapA定点突变蛋白在水解N末端为赖氨酸的蛋白质和多肽中的应用。
4.一种如权利要求1所述的氨肽酶LapA定点突变蛋白的获得方法，包括以下步骤：
(1)以含有嗜肺军团菌氨肽酶LapA编码基因的质粒为模板，采用全质粒定点突变方法，以突变引物为特异性扩增引物，进行PCR扩增，获得突变蛋白的编码基因；
(2)将步骤(1)获得的突变蛋白的编码基因连接至经DpnⅠ消化甲基化的模板质粒，获得重组表达质粒；
(3)将步骤(2)的重组表达质粒导入感受态细胞中进行蛋白表达并纯化，获得所述突变蛋白。
5.根据权利要求4所述的一种氨肽酶LapA定点突变蛋白的获得方法，其特征在于，所述步骤(1)的突变引物为：
上游引物：5'TGAAACCAGTTTCGCTGATGACAACCCATACAT 3'
下游引物：5'AAGAAGTATGGATGTATGGGTTGTCATCAGCGAA 3'。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽大学，未经安徽大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201911308023.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
