[发明专利]一种DNA四面体与替莫唑胺的纳米复合物

说明书

本发明提供了一种DNA四面体与替莫唑胺形成的纳米复合物，优选地，它还共价连接了核酸适配体AS1411和/或核酸适配体GS24。本发明还提供了前述复合物的制备方法，它是通过DNA四面体与替莫唑胺振荡孵育，离心后取上清，即得。本发明还提供了前述复合物在制备抗肿瘤药物特别是抗胶质瘤药物中的用途。本发明相比替莫唑胺，具有更高的药效，且能逆转肿瘤细胞对替莫唑胺的耐药性，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于抗肿瘤药物领域，尤其涉及一种DNA四面体与替莫唑胺的纳米复合物。

背景技术

DNA四面体(Tetrahedral DNA，TDN)，又称四面体框架核酸(TetrahedralFramework Nucleic Acid，tFNA)，是近年来新兴的纳米材料。DNA四面体是在特定反应条件下，让四条特定序列的DNA单链根据碱基互补配对的原则自组装成具有四面体形状的三维纳米结构。因为tFNA具有良好的生物兼容性、可编辑性、低毒副性和机械刚性，使得它在生物检测、基因传递、活体成像和药物运输等领域有广泛的应用前景。

替莫唑胺(Temozolomide，TMZ)是目前临床上用于治疗恶性胶质母细胞瘤(Glioblastoma，GBM)的一线靶向化疗药。虽然TMZ能有效透过血脑屏障并靶向杀伤胶质瘤细胞，但是长期使用TMZ容易产生骨髓抑制，且有接近50％的患者在使用TMZ会快速产生耐药。目前有几项研究正尝试运用不同的纳米载体运载TMZ治疗GBM，但是暂未发现有效的手段能克服替莫唑胺的获得性耐药。

核酸适配体是一类具有特异性结合目标物质的DNA、RNA或核酸类似物。核酸适配体AS1411是可以与核仁素特异性结合的DNA单链；核酸适配体GS24是可以与转铁蛋白受体特异性结合的DNA单链。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的抗肿瘤纳米复合物，可以克服GBM耐药的问题。

本发明的技术方案包括：

一种抗肿瘤复合物，它是DNA四面体与替莫唑胺形成的纳米复合物。

优选地，如前述的复合物，所述DNA四面体共价连接了核酸适配体AS1411和/或核酸适配体GS24；

进一步优选地：DNA四面体与核酸适配体AS1411的摩尔比是1∶1；和/或，DNA四面体与核酸适配体GS24的摩尔比是1∶1。

如前述的复合物，所述DNA四面体共价连接有荧光标记基团，优选地，所述荧光标记基团是Cy5。

前述复合物的制备方法，它是通过DNA四面体与替莫唑胺振荡孵育，离心后取上清制备得到。

如前述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将替莫唑胺与DNA四面体混合后在100-1000rpm的振荡速率下孵育3-9小时；

2)将混合液离心后，取上清即得。

如前述的制备方法，步骤1)的振荡速率是600-700rpm。

如前述的制备方法，步骤1)的孵育时间是6小时。

如前述的制备方法，步骤2)的离心转速是6000rpm。

如前述的制备方法，所述DNA四面体共价连接了核酸适配体AS1411和/或核酸适配体GS24。

如前述的制备方法，所述DNA四面体还共价连接有荧光标记基团，优选地，所述荧光标记基团是Cy5。

DNA四面体与替莫唑胺的纳米复合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

如前述的用途，其特征在于，所述DNA四面体共价连接了核酸适配体AS1411和/或核酸适配体GS24。