[发明专利]净化污水水体的个性化活性复合微生物菌剂的制备方法

权利要求书

1.个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法，包括以下步骤(详见本公司专利：CN109988725A)：

(1)根据权利1要求所诉的个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法其特点在于，首先要对净化污水水体样本进行检测以及处理，其次要对其中的微生物DNA进行抽提。为此本公司采用高尖端检测技术，用515F/806R PCR引物对微生物DNA的16S rRNA基因的V4高变区进行扩增。再其次本公司要测定其菌群含量，主要步骤为：先把样本中微生物的总DNA提取出来，然后以16S rRNA作为目标序列，本公司用515F/806R PCR引物对其进行最终绝对定量。

(2)根据权利1要求所诉的个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法其特点在于，本公司要测定样本中不同微生物菌群比例，其为主要步骤之一。首先本公司要测序扩增的产物通过使用高通量基因测序技术进行。其次本公司对其分析评估，是检测测序结果更具有价值。然后本公司要把之前经过检测得出的测序结果与16S rRNA的微生物基因序列数据库进行比对，以此来确定我们检测的样本中不同活性微生物菌群的相对含量和比例。之后本公司需要确定针对样本进行净化的菌剂的配方，其特点在于：首先我们要把之前将测定出的微生物菌群含量与该污水水体微生物数据库中该微生物菌群的含量分布进行比对，若其比对结果得出相对含量≤25％，则提供的菌剂配方中该微生物菌群的活性含量不低于5×10⁷cfu/g(mL)；若其比对结果得出相对含量＞25％，则提供的菌剂配方中该微生物菌群的活性含量不低于1×10⁷cfu/g(mL)；

(3)根据权利1要求所诉的个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法其特点在于，本公司针对如何净化污水水体菌种发酵步骤如下：其重点在于将步骤(2)中确定的菌剂配方与发酵基质进行混合发酵，当发酵基质的pH值到达或接近5.0时，则发酵成熟。

2.个性化活性复合微生物菌剂净化污水水体所需要的系统,其特征在于,所述系统的为储备污水水体的水库,进水处为水库一端,出水处一端为小出水口:水库采用蓄水减排的模式,增加蓄持时间,确保菌体、代谢物和污染物复合体被系统中微生物所截留。

3.根据权利1要求所诉的个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法其特点在于：把515F-GTGCCAGCMGCCGCGGTAA，806R-GGACTACHVGGGTWTCTAAT作为采用515F/806R PCR的引物。

4.根据权利1要求所诉的个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法其特点在于：通过选择污水水体样本中常见多种菌株16S rRNA的微生物基因序列的测定，参照本公司自主总结以及开发的数据库菌株的系统分类名称和DNA序列信息，来构建具有本公司自主知识产权的水体生物信息数据库分析和管理平台的方法。净化污水水体微生态个性化菌剂配方的微生物菌种，包含芽孢菌、酵母菌、放线菌、光合细菌等相关一系列微生物菌种。以及我们16S rRNA的微生物基因序列数据库的构建方法是通过运用具有本公司自主知识产权的水体生物信息数据库来选择及确定污水水体样本中常见几百种菌株的名称和其约1.8kb大小的16SrRNA基因的DNA序列。数据库中包括菌株的详细系统分类名称和DNA序列信息。以及某一种族的大量污水水体样本中微生物组成分布比例信息是本公司通过高通量测序方法获得。

5.根据权利1要求所诉的个性化活性复合微生物菌剂净化污水菌剂配方的制备方法其特点在于：根据上述步骤确定其需要菌种来接着确定其发酵基质。在其菌种所需要的适当的发酵生产的条件发酵。

6.根据权利要求1所述的一种净化污水水体微生态个性化菌剂配方的制定方法，其特征在于：发酵结束，将发酵液混匀，浓缩，离心，过滤，冷却，检测，调配后得到液态的净化污水水体微生态产品；贮藏在无阳光直射、阴凉通风处。