[发明专利]一种检测利什曼原虫的引物对、探针及检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201911301367.6 | 申请日： | 2019-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN110734995B | 公开（公告）日： | 2020-04-17 |
| 发明（设计）人： | 杨国威;吴云;王磊 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学附属北京友谊医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人： | 张丹;徐丹丹 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 利什曼 原虫 引物 探针 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测人外周血单核细胞、骨髓或皮肤中利什曼原虫的试剂盒，其特征在于，包含引物-F、引物-R和探针Probe，所述的引物-F序列为SEQ ID No：1，所述的引物-R 序列为SEQID No：2，所述的探针Probe序列为SEQ ID No：3。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒内还含有PCR扩增反应试剂。
3.引物-F、引物-R和探针Probe的组合在制备检测人外周血单核细胞、骨髓或皮肤中利什曼原虫产品中的应用，所述的引物-F序列为SEQ ID No：1，所述的引物-R 序列为SEQ IDNo：2，所述的探针Probe序列为SEQ ID No：3。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的检测利什曼原虫的产品的检测方法包括如下步骤：以待测样品的DNA为模板，利用引物-F、引物-R和探针Probe进行荧光定量PCR扩增，通过标准曲线计算出利什曼原虫的含量，所述的待测样品为人外周血单核细胞、骨髓或皮肤。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述荧光定量PCR扩增的反应体系包括：引物-F、引物-R和探针Probe，模板DNA，热启动酶，氯化镁，dNTPs，缓冲液，若丹明参考染料，无菌双蒸水。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述荧光定量PCR扩增的反应条件：94-96℃ 2-3min；94-96℃ 15-30s，53-56℃ 15-30s，72℃ 30-40s，共35-40个反应循环。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述荧光定量PCR扩增的反应条件：95℃2min；95℃15s，55℃15s，72℃30s，共40个反应循环。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于首都医科大学附属北京友谊医院，未经首都医科大学附属北京友谊医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201911301367.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
