[发明专利]一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法

说明书

本发明属于生物提取技术领域，特别涉及一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法，首先取微藻藻泥用CaCl₂溶液进行溶胀破壁同时溶出藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷，再经过固液分离和多次膜过滤纯化、分离藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷，得到高纯度的藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷。本发明可在盐胁迫的微藻细胞中，既提取出食品级藻蓝蛋白，又同时获得甘油葡萄糖苷，并且提取工艺简单，既能降低企业生产成本，又能提高经济效益，应用范围更广。

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体地说涉及一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法。

背景技术

微藻是自然界中广泛分布的原核生物，具有减轻癌症放疗、化疗的毒副反应，提高免疫功能，降低血脂等功效。由于其生长过程中可以同时合成油脂、糖类和藻蓝蛋白、甘油葡萄糖苷(Glucosylglycerol，简称GG)等高附加值的化合物，因此被广泛应用在食品及医药等行业方面。目前都只能对单一藻蓝蛋白或甘油葡萄糖苷进行提取，而无法实现同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷，因此不能充分利用微藻原料的营养价值，经济效益不高。

发明内容

针对现有技术的不足，发明人在长期实践中研究设计出一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法，该法可以同时提取藻蓝蛋白及甘油葡萄糖苷，达到简化提取工艺目的，同时提高经济效益为生产微藻高附加产品提供技术支撑。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种同时提取藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的方法，包括以下步骤：

获得盐胁迫的藻泥；以及包括：

工序一溶胀破壁：将获得的盐胁迫藻泥与浓度为1g/l～10g/lCaCl₂溶液在4℃～40℃环境下混合，盐胁迫藻泥与CaCl₂溶液按体积比1:10～100的比例混合，并遮光处理，溶胀时间为6～72小时，藻蓝蛋白与甘油葡萄糖苷同时破壁溶出，得到藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的混合液；

工序二固液分离：将工序一所得藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的混合液在4℃～40℃环境下，通过离心机或过滤装置进行固液分离，得到含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的粗提液；

工序三精细过滤：将工序二所得含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的粗提液采用膜过滤方法处理，所用过滤装置包括至少两级不同孔径的滤膜，所述孔径逐级递减，首级滤膜孔径为0.1μm～5μm，末级的滤膜孔径为1500D～0.1μm，去除杂质，得到含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的透过液；

工序四超滤：将工序三所得含有藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷的透过液采用膜过滤方法分离藻蓝蛋白和甘油葡萄糖苷，选用的膜孔径为1500D～0.1μm，在温度4℃～40℃、压力为50Kpa～2Mpa环境下进行超滤，藻蓝蛋白与甘油葡萄糖苷分离，得到藻蓝蛋白浓缩液和含有甘油葡萄糖苷的透过液。

进一步地，所述方法还包括工序五，将工序四所得含有GG的透过液采用膜过滤方法进行纳滤浓缩，选用的膜孔径不大于300D，料液桶内为GG浓缩液。

进一步地，所述方法还包括工序六，在工序四所得藻蓝蛋白浓缩液里添加海藻糖和柠檬酸钠，将添加海藻糖和柠檬酸钠后的藻蓝蛋白浓缩液和工序五所得GG浓缩液经过干燥处理，得到高纯度的藻蓝蛋白干粉和GG干粉。

进一步地，工序二中，工序二中，所述离心机为管式离心机、碟片离心机或三足离心机；所述过滤装置为板框过滤机，板框过滤机的滤布大小为600～2000目。

进一步地，工序六中，所述海藻糖和柠檬酸钠在藻蓝蛋白浓缩液里的添加量按照体积比藻蓝蛋白：柠檬酸钠：海藻糖为40％～90％：10％～40％：10％～40％的比例添加，且三者比例总和为1。

进一步地，工序六中，通过真空冷冻干燥、喷雾干燥或烘干干燥进行干燥处理。