[发明专利]一种用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法

权利要求书

1.一种用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：

对同一病种多个相关病例的包埋蜡块组织进行HE染色及组织学观察，在每个所述HE切片上确认并标记目的细胞区；

对比所述HE切片上标记的细胞区，准确标记定位所述包埋蜡块上相对应的目的细胞区位置，核对所有被标记的所述包埋蜡块；

使用具有孔径的针，将多个所述相关病例的包埋蜡块的目的细胞区穿在同一蜡块的不同位置上，并在所述蜡块上做好标记，形成了组织芯片，并对其进行HE染色，显微镜下确定是否为目的细胞区域的组织芯片。

2.如权利要求1所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

所述方法还包括：用所述组织芯片进行原位杂交、荧光原位杂交、原位PCR或原位RT-PCR。

3.如权利要求1所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

所述针的直径为1mm。

4.如权利要求1所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

所述HE切片标记的目的细胞区域的数量为1-4个。

5.如权利要求1所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

所述方法还包括：

用所述组织芯片的蜡块提取目的细胞的RNA，以及通过mRNA反转录获得cDNA。

6.如权利要求5所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

所述RNA溶液浓度和纯度紫外分光光度计波长260nm和280nm处吸光度的比值确定。

7.如权利要求5所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

将所述cDNA进行荧光定量PCR，检测所述目的细胞的基因表达量。

8.如权利要求7所述的用于石蜡包埋组织分离检测细胞的方法，其特征在于，

所述cDNA的添加量不要超过PCR反应体系体积的10％。