[发明专利]工程化抗原递呈细胞、免疫调节组合物及应用

说明书

本发明公开一种工程化抗原递呈细胞、免疫调节组合物及应用。本发明的工程化抗原递呈细胞通过工程化手段在野生型抗原递呈细胞内引入外源基因从而过表达重组白介素‑15、重组白介素‑15受体α、TGF‑β结合肽和PD1‑CD80融合蛋白而得到。本发明通过各组分的协同作用促进CD3+免疫细胞的活化。

技术领域

本发明涉及免疫学以及医药领域，具体地涉及用于增强T细胞活化的工程化抗原递呈细胞、免疫调节组合物及其应用。

背景技术

传统上，肿瘤细胞免疫疗法主要为通过接种或过继细胞免疫疗法刺激免疫系统，从而引发免疫应答。这种方法是基于这样的假设：肿瘤细胞表达肿瘤特异性抗原，并被MHC复合物呈递到肿瘤细胞表面，而抗肿瘤T细胞没有被充分激活。因此，为了解决这个问题，主要是尝试通过刺激关键的正的共免疫性和先天免疫途径，如CD28，CD40L(CD154)和各种TLR受体，或者抑制负的免疫抑制途径(如CTLA-4受体)而增加这些抗原的识别。

大量研究发现，肿瘤组织及其区域淋巴结中浸润性树突状细胞(TIDC)的膜上的CD80表达明显受到抑制，使DC不能有效的诱导抗肿瘤免疫而引起局部免疫功能低下，从而导致肿瘤细胞逃逸。

近年来，DC肿瘤疫苗在肿瘤的预防和治疗中方面展现了较好的应用前景。DC相关疫苗在前列腺癌中的研究较为深入。如Sipuleucel-T直接将前列腺癌酸性磷酸酶抗原转染DC激发机体产生特异性的抗肿瘤反应。IMPACT研究显示，尽管客观有效率评价显示治疗效果有限(5％)，Sipuleucel-T组的中位生存时间(25.8个月)要高于对照组(21.7个月)4.1个月。2010年4月，美国FDA批准Sipuleucel-T用于治疗无症状或症状轻微的转移性去势治疗无效的难治性前列腺癌(Castration-resistant prostate cancer，CRPC)。

在胶质瘤中，负载自体肿瘤裂解物的DC疫苗DC-VAX-L尚在进行III期临床试验中。有电穿孔法将自体肾脏肿瘤的RNA和CD40L mRNA电转到DC的肿瘤疫苗，与靶向药物舒尼替尼联用的报道，目前也在临床试验中。近期的研究发现，DC疫苗能显著延长患者生存期。

发明内容

本发明提供一种工程化免疫细胞，用于解决现有技术中的至少部分技术问题。本发明发现通过工程化手段改造抗原递呈细胞使其在过量表达重组白介素-15及其受体α，同时表达TGF-β结合肽和PD1-CD80融合蛋白可以大大提高其活化CD3+免疫细胞的能力。至少部分地基于该发现完成了本发明。具体地，本发明包括以下内容。

本发明的第一方面，提供一种工程化抗原递呈细胞，其通过工程化手段在野生型抗原递呈细胞内引入外源基因从而过表达重组白介素-15、白介素-15受体α、TGF-β结合肽和PD1-CD80融合蛋白而得到。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，优选地，所述外源基因包含编码重组白介素-15和重组白介素-15受体α的基因、编码TGF-β结合肽的基因和编码PD1-CD80的基因。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，优选地，所述编码重组白介素-15和白介素15受体α的基因为同时编码白介素-15和白介素15受体α两者的基因，且编码所述重组白介素-15的基因序列如SEQ ID No.2所示或与其同源性为95％以上且来源于同一物种。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，优选地，所述编码PD1-CD80的基因序列如SEQID No.7所示或与其同源性为95％以上且来源于同一物种。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，优选进一步包含抗原或编码所述抗原的核酸。更优选地，所述抗原为GPC3抗原。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其中，其为树突细胞。

本发明的第二方面，提供一种免疫调节组合物，其包含第一方面所述的工程化抗原递呈细胞和/或其分泌物。