[发明专利]一种药品中克霉唑含量的气相色谱-质谱测定方法

说明书

本发明公开了一种药品中克霉唑含量的气相色谱‑质谱测定方法，该方法为将片剂、乳膏、凝胶、栓剂、溶液样品经不同前处理后，采用气相色谱‑质谱(GC‑MS)进行检测，同位素内标法定量。在优化的条件下，克霉唑在0.05～5.0μg/mL范围内呈良好的线性关系，相关系数为0.9999，方法平均回收率为88.5％～103.2％，相对标准偏差不大于3.6％。本方法提取效率高、灵敏度高、重复性好，可用于药品中克霉唑含量的测定。

技术领域

本发明涉及药品检测领域，涉及气相色谱-质谱检测法，具体是指一种药品(片剂、乳膏、凝胶、栓剂和溶液样品)中克霉唑含量的的测定方法。

背景技术

克霉唑是一种咪唑类广谱抗真菌药，临床上用于浅部及某些深部真菌感染的治疗，如皮肤霉菌病、手足癣、体癣、耳道、阴道霉菌病等。复方克霉唑搽剂、复方替硝唑栓剂、复方克霉唑溶液、克霉唑阴道片是临床常用的药物，具有见效快、低毒、高效以及广谱抗菌效果，其中克霉唑是其主要成分。临床主要是采用滴定和高效液相色谱法测定克霉唑含量，为了更加快速、准确、灵敏地测定药品中的克霉唑含量，本发明采用了气相色谱-质谱法快速、准确测定药品中克霉唑的含量。

发明内容

本发明提供一种药品(片剂、乳膏、凝胶、栓剂和溶液样品)中克霉唑含量的气相色谱-质谱测定方法，该方法具有前处理简单快速、抗基质干扰强、准确、灵敏度高的优点，为药品(片剂、乳膏、凝胶、栓剂和溶液样品)中克霉唑的快速、准确检测提供了可靠的分析方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：本发明提供的一种药品中克霉唑含量的气相色谱-质谱测定方法，包括以下步骤：

步骤(1)：样品的制备和提取

(1.1)含有克霉唑的片剂、乳膏、凝胶样品的制备和提取：含有克霉唑的片剂取1片用水溶解并定容至500mL，含有克霉唑的乳膏称1.0g、含有克霉唑的凝胶取一支，分别用丙酮溶剂溶解并定容至30mL。

各取1mL上述液体，加入5mL乙腈提取，再加入1g氯化钠盐析，静置分层，移取乙腈层至10mL刻度离心管中，下层再加入5mL乙腈进行提取，合并提取层于10mL刻度离心管中并用乙腈定容至10mL。取上述定容液0.1mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，制得待测样品溶液，供气相色谱-质谱GC-MS测定。

(1.2)含有克霉唑的栓剂样品制备和提取：取含有克霉唑的栓剂一枚，用乙酸乙酯/环己烷(1:1,v/v)溶解并定容至100mL。取10μL上述液体，于10mL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，制得待测样品溶液，供气相色谱-质谱GC-MS测定。

(1.3)含有克霉唑的溶液样品的制备和提取：取1mL含有克霉唑的溶液，加甲醇稀释并定容至10mL。取10μL上述液体，于10mL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，制得待测样品溶液，供气相色谱-质谱GC-MS测定。

步骤(2)：标准曲线的配制：取克霉唑标准品10mg，用乙腈溶解并转移至100mL容量瓶中，用乙腈定容，配制100μg/mL克霉唑标准储备液；取d5-克霉唑标准品1mg，用乙腈溶解并转移至10mL容量瓶中，用乙腈定容，配制100μg/mLd5-克霉唑标准储备液。各取100μg/mL的克霉唑和d5-克霉唑标准储备液1mL，并分别用乙腈稀释定容至10mL，配制成10μg/mL克霉唑和d5-克霉唑标准工作液。制作校准曲线用工作溶液制备：各取5、1、0.2、0.1、0.05mL的10μg/mL的克霉唑标准工作溶液，分别加入200μL的10μg/mL的d5-克霉唑标准工作溶液，用乙腈定容至10mL，配成0.05、0.1、0.2、1.0、5μg/mL的系列浓度标准曲线溶液，其中d5-克霉唑同位素内标溶液浓度均为0.2μg/mL。

步骤(3)：待测样品溶液的检测：将步骤(1)中制备的待测样品溶液和步骤(2)中制备的标准曲线溶液在气相色谱-质谱仪上分别进样，根据标准曲线对定量离子进行内标法定量计算，获得待测样品溶液中克霉唑的浓度，继而获得药品中克霉唑的含量。