[发明专利]一种工程菌株、其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201911285363.3 | 申请日： | 2019-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN112980710B | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 赵宗保;张月;张素芳;焦翔 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/31;C12N15/90;C12P7/6463;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京元周律知识产权代理有限公司 11540 | 代理人： | 张莹;杨晓云 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 工程 菌株 构建 方法 应用 | ||
1.一种工程菌株，其特征在于，所述工程菌株是脂滴大小调控菌株，所述脂滴大小调控菌株通过调控出发菌株中的CALs基因功能灭活获得；
所述出发菌株包括圆红冬孢酵母
2.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于，所述工程菌株包括ΔCALs菌株，ΔCALs菌株的保藏编号为CGMCC：18928。
3.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于，所述出发菌株表达Cas9和/或表达RNAi机制的Ago蛋白和Dicer酶基因。
4.一种工程菌株的构建方法，其特征在于，所述工程菌株是脂滴大小调控菌株，所述构建方法包括调控出发菌株中的CALs基因功能灭活的步骤，
其中，所述调控通过CRISPR/Cas9系统的基因编辑和/或RNAi机制完成；
所述出发菌株包括圆红冬孢酵母
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，调控所述CALs基因功能灭活的步骤包括：
构建具有SEQ ID NO：14所示的核苷酸序列的CALs-sgRNA载体；
将CALs-sgRNA载体导入表达Cas9的工程菌株，筛选、培养后得到CALs功能灭活的工程菌株。
6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述出发菌株为天然产油酵母菌。
7.根据权利要求1~3任一项所述的工程菌株或权利要求4~6任一项所述的构建方法构建的工程菌株在调控脂滴大小和油脂合成中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括通过调控出发菌株中CALs基因的表达水平来调控脂滴的大小。
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