[发明专利]一种用于研究脑-肠神经环路的方法及其应用有效
| 申请号： | 201911284121.2 | 申请日： | 2019-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN111088288B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 湛琴琴;李志玲;詹阳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N15/869 | 分类号： | C12N15/869;G01N21/64;A61D1/00;A61D7/00 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 研究 神经 环路 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述方法包括：向哺乳类动物的肠壁注射携带目的基因的跨突触病毒，使其在中枢神经系统和外周神经系统同时表达目的基因，并以此研究脑-肠神经环路。
2.如权利要求1所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述目的基因包括标记神经元的基因；
优选地，所述标记神经元的基因包括增强型绿色荧光蛋白基因。
3.如权利要求1或2所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述跨突触病毒包括伪狂犬病病毒；
优选地，所述伪狂犬病病毒为PRV152；
优选地，所述哺乳类动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、猪、狗或兔。
4.如权利要求1-3中任一项所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述向哺乳类动物的肠壁注射携带目的基因的跨突触病毒的方法包括如下步骤：将哺乳类动物麻醉后进行开腹，暴露肠道组织；将病毒溶液注射入肠壁组织；将肠道归位并缝合。
5.如权利要求4所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述哺乳类动物为小鼠，所述开腹是指以小鼠腹部偏左侧距离生殖器纵向线0.8-1.2cm的地方为起点，从骨盆至胸骨做3-4cm的垂直切口。
6.如权利要求4或5所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述哺乳类动物为小鼠，所述注射的部位为小鼠结肠后段中部位置；
优选地，所述病毒溶液的注射量为6-10μL；
优选地，所述病毒溶液的浓度为105-107pfu/mL；
优选地，所述注射的速率为0.5-1.5μL/min。
7.如权利要求4-6中任一项所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述缝合包括肌肉层缝合和表皮层缝合；
优选地，所述肌肉层缝合采用间断缝合方式；
优选地，所述表皮层缝合采用连续缝合方式。
8.如权利要求1-7中任一项所述的用于研究脑-肠神经环路的方法，其特征在于，所述表达的时间为距离向哺乳类动物的肠壁注射携带目的基因的跨突触病毒110-120h后。
9.如权利要求1-8中任一项所述的用于研究脑-肠神经环路的方法在研究脑-肠神经环路中的应用。
10.如权利要求1-8中任一项所述的用于研究脑-肠神经环路的方法在研究社交行为中的应用。
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