[发明专利]奥希替尼耐药细胞株NCI-H1975/AR及其应用

说明书

本发明公开了一种奥希替尼耐药细胞株NCI‑H1975/AR及其应用。所述耐药细胞株为非小细胞肺癌对AZD9291耐药细胞株，即人肺腺癌细胞NCI‑H1975/AR，已于2019年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：C201982。该耐药株耐药倍数在10倍以上，可在作用浓度为100nmol AZD9291的培养体系中稳定生长、传代，对AZD9291的耐药倍数(RI)为17.7倍，为研究非小细胞肺癌对靶向药耐药机制、寻找克服非小细胞肺癌耐药的有效治疗方法及指导临床用药提供了耐药细胞模型，具有重要的作用和良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域。更具体地，涉及一种奥希替尼耐药细胞株NCI-H1975/AR及其应用。

背景技术

肺癌位居全球癌症死亡率中的第一位，非小细胞肺癌(Non-small-cell lungcancer，NSCLC)占肺癌的80％。非小细胞肺癌5年生存率小于15％，主要原因是大约70％的患者首次诊断为非小细胞性肺癌时已处于晚期，多合并有远处转移。肺癌是率先在临床中应用靶向治疗的癌症种类之一。在过去的十年中，表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)是治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的重要药物，其靶点为表皮生长因子受体(Epidermal GrowthFactor Receptor，EGFR)。该类药物具有确切的疗效、轻微的不良反应和口服给药的便利等特点，突破了传统化疗药物的瓶颈。

目前临床上应用的第一代EGFR-TKI有厄洛替尼(商品名特罗凯)、吉非替尼(商品名易瑞沙)、和埃克替尼(商品名凯美纳)，一代TKI为可逆性EGFR-RTK抑制剂，主要针对两种常见突变(19号外显子缺失突变和21号外显子L858R突变)。二代EGFR-RTK有阿法替尼，适应征同一代EGFR-TKI，但是一种不可逆EGFR抑制剂，主要针对EGFR的G719X、L861Q和S768I等罕见突变位点。三代及后续EGFR-TKI包括AZD9291和CO-1686等化合物，不可逆抑制EGFR，对野生型EGFR也存在抑制作用，并且对发生T790M耐药突变的患者仍有较高的有效率。第一、二代靶向药物虽然疗效显著，但2/3的患者都会在使用药物1-2年出现抗药性，肿瘤可能开始反弹。每个病人对靶向药产生抗药性的原因不尽相同，但50％～60％的EGFR抑制剂耐药与T790M突变有关。AZD9291(奥希替尼)是一种口服的小分子第三代EGFR-TKI，是首个针对EGFR T790M突变的肺癌药物，能靶向非小细胞肺癌的EGFR基因突变(包括18，19，21突变)和EGFR-TKI获得性耐药(T790M)。AZD9291(奥希替尼)在非小细胞肺癌中取得了显著的疗效。

然而，AZD9291(奥希替尼)靶向治疗长期使用后，几乎所有患者都会产生耐药性。因此，模拟NSCLC肺癌AZD9291耐药过程并深入明确NSCLC AZD9291耐药机制具有重要意义。目前，国内外已经建立了很多肿瘤的耐药细胞株，但尚无非小细胞肺癌对AZD9291一线耐药的细胞株。

发明内容

本发明旨在提供非小细胞肺癌对第三代EGFR-TKI药物奥希替尼(AZD9291)耐药的细胞株。

本发明的目的是提供一种对第三代EGFR-TKI药物奥希替尼(AZD9291)耐药的人肺腺癌耐药细胞株NCI-H1975/AR。

本发明另一目的是提供所述人肺腺癌耐药细胞株NCI-H1975/AR在筛选逆转肿瘤耐药性药物中的应用。

本发明再一目的是提供所述人肺腺癌耐药细胞株NCI-H1975/AR在在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：