[发明专利]一种用于大鼠胚胎干细胞的光源可控型细胞培养箱

说明书

本发明公开了一种用于大鼠胚胎干细胞的培养液，包括培养基、光照保护剂、培养添加剂；光照保护剂为枸杞提取物、黄芪提取物、茶多酚的混合物。本发明还公开了基于该培养液的配方方法和培养箱。本发明通过光照的方式，促进了大鼠胚胎干细胞的培养，同时不影响胚胎干细胞自身的功能，起到了积极的效果。

技术领域

本发明属于细胞培养的技术领域。具体来说是提供了一种用于大鼠胚胎干细胞的光源可控型细胞培养箱。

背景技术

中国专利CN103031272A公开了一种用于大鼠胚胎干细胞的培养基，指出通过加入分化抑制剂能有效抑制大鼠胚胎干细胞的分化，建立能生殖传代的大鼠的胚胎干细胞株，并且使培养的大鼠干细胞可以经打靶后有稳定的核型。

申请人通过实验，也发现加入分化抑制剂后，对于大鼠胚胎干细胞的培养也存在着一定的抑制作用，因此有必要针对这一问题提出新的解决方案。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于大鼠胚胎干细胞培养的培养液、培养方法，以及基于该培养方法所研制的培养装置。

本发明的第一方面，提供一种用于大鼠胚胎干细胞的培养液，所述培养液包括培养基、培养添加剂；

所述培养基由DMEM/F12培养基与神经细胞基础培养基混合配制而成；

所述培养添加剂包括分化抑制剂以及Pluripotin，并且所述的分化抑制剂包括GSK抑制剂、FGFR抑制剂和MAPK抑制剂，并且，所述的添加物还包括：β-巯基乙醇；L-谷氨酰胺；

本领域技术人员也可以按照中国专利CN103031272A中所披露的培养基、培养添加剂的组分与含量进行配置；

对于本领域技术人员来说，其区别在于在上述培养液中还加入有光照保护剂，光照保护剂可以采用枸杞提取物、黄芪提取物、茶多酚中的混合物；这些物质均具有较好的抗辐射能力；之所以加入光照保护剂，是因为本发明拟采用光照的方法来促进大鼠胚胎干细胞的增长，为了避免光照对细胞本身产生不良的影响，因此通过加入适量的光照保护剂，从而降低大鼠胚胎干细胞受到的影响，提高大鼠胚胎干细胞的生存率以及核型的稳定；

光照保护剂选用中药提取物，不但可以提升抗照射的能力，同时也能够为大鼠胚胎干细胞的培养提供一定的营养，具备双重的效果；

光照保护剂加入的质量是整个培养液质量的1％至20％，优选的光照保护剂的质量占整个培养基质量的10％。

本发明的第二方面，提供了一种大鼠胚胎干细胞的培养方法，即在前述的培养液的存在下，培养大鼠胚胎干细胞，并在培养过程中，进行光照。

光照的本质是产生一定的频率，进而对细胞的生长产生促进作用，可使用的光照为可见光。

本发明的第三方面，提供了一种光源可控型细胞培养箱，主要是基于现有的光照培养箱存在的问题，包括：培养箱内的空间有限，通过改变LED灯到培养皿的距离能够改变的光照强度范围很小，根本无法满足细胞培养的需求；第二，上述设备在使用时培养箱的环境一致，无法做对照试验组，需要设置多个设备进行对照试验，增加了实验成本。

因此本申请改进后的光源可控型细胞培养箱，包括箱体、移动机构、间隔机构和照明机构，所述移动机构安装在箱体内侧的底部，所述间隔机构安装在移动机构的上端，所述照明机构安装在间隔机构的上端，所述箱体的内部设有环境监测装置，所述箱体的两侧分别设有进气管和出气管，所述进气管和所述出气管均与箱体内部连通，所述箱体的内侧壁上设有摄像头，所述摄像头朝向间隔机构设置，所述箱体的前端设有箱门，所述箱体的下端设有存储柜，所述箱体的旁侧设有显示器。