[发明专利]多种细胞鉴定试剂盒及操作方法

说明书

本发明涉及一种多种细胞鉴定试剂盒及操作方法。该试剂盒包括试验孔板和分别容纳活细胞染色剂和清洗剂的试剂瓶，所述试验孔板包括孔板架和可拆卸设置在所述孔板架内且带有多个待测孔的多条包被可拆板条。另外，该试剂盒还包括可拆卸设置在所述孔板架内且带有多个待测孔的多条未包被可拆板条、位于所述孔板架下方并与可其贴合设置的孔板磁力底座以及容纳磁珠偶联抗体、细胞通透剂、死细胞染色剂的试剂瓶。本发明还涉及多种细胞鉴定试剂盒的操作方法。利用本发明的试剂盒能够快速、准确地鉴定MSC细胞、NK细胞、CIK细胞、肺癌细胞、前列腺癌细胞等多种细胞，且具有操作步骤简单、结果易判断和适用样本广等优点。

技术领域

本发明涉及细胞鉴定领域，尤其是涉及一种能够鉴定多种细胞的试剂盒及操作方法。

背景技术

目前细胞诱导、癌细胞诊断等常用的诊断方法是流式细胞术、酶联免疫法、免疫组化法。

流式细胞术通过荧光耦合的抗体标记目的细胞检测荧光信号来进行细胞鉴定，需要使用荧光染料与流式细胞仪配套使用，导致检测成本增加。另外，荧光抗体需避光保存，荧光易淬灭造成检测结果不准确，因此，检测者需要掌握流式细胞仪操作方法与数据处理分析的专业知识。

对于酶联免疫法，需要同时检测抗体与包被抗体两种抗体，从而使得成本增加。另外，检测物是细胞分泌物或细胞裂解液而非细胞本身，操作步骤较为繁杂。

免疫组化法需要对细胞组织进行包埋切片，染色步骤虽然可以手动操作，但仍需要使用切片机、摊片机、包埋机、显微镜等，导致检测成本增加。同时，免疫组化需要使用一抗二抗两种抗体以及配套染色液、抗原封闭液、抗原修复液等，检测成本增加。另外，免疫组化步骤包括包埋、切片、烤片、脱蜡、修复、阻断、封闭、加一抗、加二抗、显色、复染、脱水透明、封片等操作极为繁杂，并且显微镜结果的判断需要专业知识人员判断。

因此，在本领域中仍然需要一种能够以简单有效的方式及时、快速且准确鉴定多种细胞的技术手段。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的一个目的在于提供一种能够以简单有效的方式及时、快速且准确地鉴定多种细胞的细胞鉴定试剂盒。所述多种细胞包括但不限于间充质干细胞(MSC)、自然杀伤(NK)细胞、细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞、肺癌细胞和前列腺癌细胞。

上述目的通过以下方案来实现：

在第一方面，一种多种细胞鉴定试剂盒，其包括试验孔板和分别容纳活细胞染色剂和清洗剂的试剂瓶，所述试验孔板包括孔板架和可拆卸设置在所述孔板架内且带有多个待测孔的多条包被可拆板条。在一个优选方案中，所述试验孔板还包括与所述孔板架盖合的孔板盖。在一个优选方案中，所述包被可拆板条上可包被有抗体CD45、CD105、CD34、CD90、CD73、CD3、CD56、CEA、CA125等中的一种或多种。

在该技术方案中，利用所提供的多种细胞鉴定试剂盒，能够利用细胞膜标志物来鉴定多种细胞，例如MSC细胞、NK细胞、CIK细胞和肺癌细胞。具体而言，通过不同的包被可拆板条包被不同的捕获抗体，能够捕获悬浮细胞中的目标细胞，然后用洗涤液去掉杂细胞，利用活细胞染色剂使被捕获的目标细胞染色，通过显色与否来判断标志物的阴阳性，最后通过酶标仪测对照组与检测组的吸光值可分析判断细胞的阳性率。

进一步地，根据前述第一方面所述的多种细胞鉴定试剂盒，所述活细胞染色剂可以为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(噻唑蓝，简称MTT)，所述清洗剂可以为磷酸盐缓冲溶液(PBS)。在一个优选方案中，所述活细胞染色剂还包含0.5-5重量％苏木素，优选1重量％、1.5重量％、2重量％、2.5重量％、3重量％、3.5重量％、4重量％、4.5重量％苏木素。