[发明专利]一种定量或半定量检测尿液中碘离子浓度的方法

说明书

本发明公开了定量或半定量检测尿液中碘离子浓度的方法，（1）在无色的ABTS溶液中加入碘化钾以及稀释后的过氧乙酸，碘离子催化过氧乙酸氧化无色的ABTS生成绿色氧化物，随着碘离子浓度增加，绿色逐渐加深，与ABTS在730 nm处的可见光吸光度呈线性增加；（2）加入红色的罗丹明B溶液后，与绿色混合使颜色差别增大，便于区分，根据反应颜色制作碘标准溶液比色卡，或根据体系可见光吸光度值对碘化钾浓度绘制标准曲线；（3）将碘化钾溶液替换为尿液样品，按步骤（1）、（2）操作，将显色结果对比碘标准溶液比色卡，或者结合标准曲线法获得尿样碘离子浓度，进行定量或半定量检测。灵敏度高、选择性好、检测简便。

技术领域

本发明属分析技术、比色传感技术和生物分析检测领域，具体涉及基于分光光度计及显色底物ABTS的比色传感方法用于定量及半定量检测尿液中的碘离子浓度。

背景技术

碘是人类生长和代谢所必需的微量物质之一，也是合成甲状腺激素的必需微量元素。机体长期缺碘会导致甲状腺机能减退和地方性甲状腺肿等疾病，产前和发育早期缺碘会导致自然流产、婴儿死亡率增加。在食盐中添加KI或KIO₃是预防碘缺乏病最简单和最有效的方法。然而，摄入过量碘又可导致甲状腺功能减退症、自身免疫甲状腺病和乳头状甲状腺癌的发病率显著增加。所以检测人体碘营养水平十分重要。肾脏是碘的主要排泄器官，人体摄入的碘约90％由肾脏排出。尿碘，即尿液中的碘元素，其排出量基本可以反应出碘的摄入量，所以尿碘是评价人体碘营养状况的临床常用指标。了解尿碘的情况，可以及时正确调整饮食中的碘摄入量，进而降低由于碘缺乏或碘过量而引起的病症发生。因此，开发一种灵敏度高、选择性好、使用方便的尿碘离子检测方法具有十分重要的意义。

近年来，电感耦合等离子体质谱、离子色谱、电喷雾串联质谱、化学发光、逆流注射分光光度法、毛细管电泳等方法已被提出用于碘化物的检测。尽管这些方法比较灵敏，但是需要昂贵的仪器或复杂的样品制备过程，不能满足现场快速检测的需求。因此，需致力于设计适用于碘化物检测的环境友好型传感器。与上述技术不同的比色法为生物样品和环境样品中碘化物的简单、低成本和快速检测提供了一种有前途的方法。

2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐溶液(ABTS)作为一种良好的显色底物，由于其出色的显色特性，在比色传感领域具有独特的优势。近年来，ABTS被广泛应用于抗氧化剂的活性检测。ABTS被氧化可生成绿色ABTS自由基，其在415nm、650nm、及730nm处均有吸收，但730nm处吸收更强，线性关系更好。因此，通过检测730nm吸光度，可以定量测定目标物质的浓度。罗丹明B染料是典型的有机发光材料，具有毒性小、水溶性好、光量子产率高等优点，是分析化学和生物医学等领域中常用的有机染料，广泛应用在生物大分子标记、重金属离子检测、荧光标记等方面。

据我们所知，目前还没有基于ABTS和罗丹明B的可见光分析法和比色法用于尿液中碘离子浓度的定量及半定量检测。

发明内容

针对现有技术的问题，本发明的目的在于提供一种定量及半定量检测尿液中碘离子浓度的方法，基于比色底物ABTS的生物分析检测技术，将玫瑰红色的罗丹明B染料作为背景颜色，与氧化产生的不同程度的绿色的ABTS氧化产物混合，使体系颜色层次更丰富，区分更明显，该显色反应快速灵敏，操作简便，产生的可视化信号,可用于可视化检测。可以直接应用于尿液中碘离子含量的检测，具有选择性好的优点。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

一种定量及半定量检测尿液中碘离子浓度的方法，步骤如下：

(1)、配制无色的ABTS溶液：ABTS溶液浓度为0.1-1mM。

(2)、配制罗丹明B溶液；罗丹明B溶液的浓度为1-20μM。

(3)、配制不同浓度碘化钾标准溶液。