[发明专利]干细胞海绵支架及制备方法和应用

权利要求书

1.一种干细胞海绵支架，其特征在于，由如下步骤制备得到：

（a）将0.3g黏度为300 mPa.s的壳聚糖加入10 mL 80% w/w的乙酸中溶解，将0.5g重均分子量为35万聚乳酸溶于10 mL六氟异丙醇中搅拌溶解；

（b）壳聚糖溶液和聚乳酸溶液按照重量比3:7混合均匀后注入注射器中，调节注射器的推进速度为1 mL/h，针头和接受装置的距离为15 cm，二者之间的电压为25 KV，电纺一个小时后得到平面结构的纳米纤维膜；

（c）将得到的平面结构的纳米纤维膜放入戊二醛蒸汽中进行交联，交联10小时；将交联好的纳米纤维放入真空干燥箱中进行干燥，3天后取出；

（d）将干燥好的纳米纤维膜放入0.5 mol/L的硼氢化钠水溶液中进行发泡，8小时后取出，取出后用去离子水冲洗数次，将去除硼氢化钠溶液的纳米纤维膜放入冷冻真空干燥机中干燥12小时，得到厚度为18.7mm，纤维直径为4.12nm的三维层状纳米纤维海绵；

（e）将脂肪来源的干细胞悬浮液填充进干细胞海绵支架中，使用补充有10％胎牛血清和1％青霉素和链霉素的培养基，并在37℃，5％ CO₂下进行孵育，三天后移植入皮肤缺损部位。