[发明专利]FGF18在制备诊断和预测卵巢癌试剂中的应用及FGF18化学发光检测试剂盒

说明书

本发明涉及医疗诊断技术领域，具体是FGF18在制备诊断和预测卵巢癌试剂中的应用及FGF18化学发光检测试剂盒。本发明优点在于：本发明首次发现FGF18蛋白作为新的卵巢癌诊断标志物，对于卵巢癌的诊断和预测具有关键意义；本发明采用磁微粒化学发光法进行试剂盒开发，相较于酶联免疫技术，有助于提高检测灵敏度和操作便捷性，同时，也有助于后期配套自动化检测仪器的检测产品的开发。

技术领域

本发明涉及医疗诊断技术领域，具体地说，是FGF18(成纤维细胞生长因子18，fibroblast growth factor 18)在制备诊断和预测卵巢癌的试剂或试剂盒中的应用，还涉及FGF18化学发光检测试剂盒。

背景技术

CA125是一种诊断卵巢癌和检测其复发常用的指标之一，但患者发病早期CA125往往检测不到，其临床应用存在一定局限性。鉴于此，研究者希望能发现一种更有效的标志物，用于卵巢癌的诊断和预测。

传统的蛋白标志物检测技术仍为酶联免疫检测技术，存在操作复杂、信号不稳定、结果判定不准确等特点。

中国专利文献CN102735846A公开了一种卵巢癌肿瘤标志物HE4化学发光免疫检测试剂盒，同时还公开了采用该卵巢癌肿瘤标志物HE4化学发光免疫检测试剂盒检测卵巢癌肿瘤标志物HE4的方法。该卵巢癌肿瘤标志物HE4化学发光免疫检测试剂盒包括9F3抗体包被的微孔板、碱性磷酸酶标记的10E1抗体、分析缓冲液、底物工作液、发光底物、洗涤液、质控品。该发明提供的卵巢癌肿瘤标志物HE4化学发光免疫检测试剂盒，线性范围为0.5纳克/毫升～1200纳克/毫升，检测限为0.2纳克/毫升，可用于卵巢癌的临床辅助诊断、疗效观察及预后判断。但是关于FGF18在制备诊断和预测卵巢癌的试剂或试剂盒中的应用目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供FGF18蛋白在制备诊断和预测卵巢癌的试剂或试剂盒中的应用，阐释新的蛋白标志物FGF18对于卵巢癌的诊断和预测的意义，并采用化学发光法开发蛋白标志物FGF18的检测试剂盒。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案：阐释FGF18在制备诊断和预测卵巢癌的试剂或试剂盒中的应用，并依此制备相应的FGF18磁微粒化学发光检测试剂盒。

1、采用自行表达FGF18蛋白和制备FGF18抗体的方式，获得FGF18检测的原材料。

2、采用蛋白偶联到磁珠的方式，将FGF18捕获抗体偶联到磁珠上获得FGF18捕获载体。采用相应的标记方法，将碱性磷酸酶标记到FGF18的检测抗体上，获得FGF18检测抗体。将FGF18标品蛋白进行相应梯度的稀释，获得FGF18的检测标品。

3、采用相应例数的正常人和卵巢癌患者血清作为FGF18的检测样本，用FGF18捕获载体与一定量的样本混匀反应，再用清洗液将样本洗去，加入FGF18检测抗体和FGF18捕获载体的FGF18蛋白结合，然后清洗出去杂蛋白和未结合检测抗体，检测反应底物，在检测仪器上读取检测信号，并将信号值与标曲相对应，获得对应值，比较正常人和卵巢癌患者间的FGF18含量差异。

本发明的第一方面，提供FGF18在制备卵巢癌诊断标志物中的应用。

本发明的第二方面，提供FGF18在制备诊断和预测卵巢癌的试剂或试剂盒中的应用。

进一步的，所述的诊断和预测卵巢癌的试剂或试剂盒是FGF18磁微粒化学发光法检测试剂或试剂盒。

进一步的，所述的诊断试剂或试剂盒是检测血浆中FGF18的表达量的试剂或试剂盒。

更进一步的，所述的诊断试剂或试剂盒是以FGF18作为生物标志物，利用磁微粒化学发光检测试剂盒，检测血浆中FGF18的表达量的诊断试剂或试剂盒。

更进一步的，当磁微粒化学发光检测试剂盒检测血浆中FGF18浓度高于150ng/ml时，提示患者可能患有卵巢癌。