[发明专利]用于血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的多肽序列及应用

说明书

本发明提供了用于血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的多肽序列，该多肽序列经免疫印迹实验验证可以与FAdV‑4型阳性血清发生生物学反应，具有生物学活性，与其余血清型的FAdV阳性血清不存在交叉反应。此外，本发明采用该多肽建立的间接ELISA检测方法可以快速灵敏的鉴定4型禽腺病毒血清抗体，减少非特异性反应引起的假阳性数据，相比较用全病毒或Hexon包被的试剂盒而言具有更好的特异性，能够有效的对4型疫苗的进行免疫评估及识别FAdV‑4型抗体。

技术领域

本发明属于兽用生物制品领域，具体涉及用于血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的多肽序列及应用。

背景技术

禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)属于禽腺病毒科、禽腺病毒属，是引起病鸡突然死亡、严重贫血、黄疸为主要临床症状的急性传染病的病原，而且禽腺病毒还常与一些能导致禽类呼吸道疾病相关的病原微生物混合感染或者在免疫抑制时发生疾病，给禽类养殖业带来巨大的损失。

研究显示，禽腺病毒I群分为12个血清型(血清型1-7、8a、8b、9-11)，禽腺病毒的结构蛋白主要是Hexon基因，它是中和抗体的靶目标和主要的保护性抗原基因，与致病性密切相关，经2015-2018年禽腺病毒的分子流行病学调查发现，近两年流行的禽腺病毒毒株在hexon基因的保守区域没有太大变化。

经调查发现，在同一养殖场中往往存在几种不同血清型的禽腺病毒，其中以FAdV-4型最为常见，但FAdV-11、FAdV-8a、FAdV-8b呈逐渐扩散的趋势，导致病原复杂，研究者难以确定感染病源，而且目前市场上关于腺病毒的疫苗比较杂乱，因此难以对免疫后的4型FAdV血清抗体分型及抗体水平进行监测。

发明内容

本发明的目的是提供用于血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的多肽序列，以解决血清4型I群禽腺病毒难以有效鉴定的问题。

本发明的目的是提供用于血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的应用，利用血清4型I群禽腺病毒鉴定的多肽建立的ELISA检测方法，可以灵敏、有效的检测4型FAdV-I的抗体情况。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

用于血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的多肽序列，所述序列如SEQ ID NO:1所示。

进一步的，所述多肽序列偶联BSA分子。

所述的多肽序列在鉴别血清4型I群禽腺病毒中的应用。

一种含有权利要求1和2所述序列的血清4型I群禽腺病毒分型鉴定的ELISA试剂盒，包括：包被抗原、抗原包被液、封闭液、样品稀释液、显色液、二抗、洗涤液、终止液、阴性标准品、阳性标准品。

进一步的，所述包被抗原为权利要求2所述的偶联BSA的多肽序列。

进一步的，抗原包被液为磷酸盐缓冲液，pH6.0。

进一步的，样品稀释液为含有0.5％BSA的磷酸盐缓冲液，pH7.4。

进一步的，所述二抗为山羊抗鸡IgG酶标二抗。

进一步的，所述终止液为2M的H₂SO₄溶液。

进一步的，所述洗涤液为0.05％PBST，pH7.4。

相对于现有技术，本发明具有以下优势：

本发明提供了一段能够鉴定FAdV-4型血清抗体的多肽，该多肽经免疫印迹实验验证可以与FAdV-4型阳性血清发生生物学反应，具有生物学活性，与其余血清型的FAdV阳性血清不存在交叉反应。