[发明专利]一种多种溶剂液态分离相的制备方法

说明书

本发明公开了一种多种溶剂液态分离相的制备方法，包括以下步骤：步骤一，溶剂基体的制备：将15‑25份的二亚苄基山梨醇加入到50‑60份的乙醇溶剂中，然后以100‑200r/min的低转速进行搅拌20‑30min，随后再加入5‑10份的改性的纳米二氧化硅，继续以300‑500r/min的转速进行搅拌15‑25min，搅拌结束，再加入4‑10份的聚乙二醇，继续搅拌20‑30min，得到溶剂基体。本发明溶剂基体采用二亚苄基山梨醇、乙醇溶剂作为常规的分离溶剂，向其中加入的聚乙二醇增强溶剂的分散性，加入的纳米二氧化硅本身比表面积大，能够提高与细胞的承载效果。

技术领域

本发明涉及细胞分离技术领域，具体涉及一种多种溶剂液态分离相的制备方法。

背景技术

大豆通称黄豆。豆科大豆属一年生草本，高30-90厘米。茎粗壮，直立，密被褐色长硬毛。叶通常具3小叶；托叶具脉纹，被黄色柔毛；叶柄长2-20厘米；小叶宽卵形，纸质；总状花序短的少花，长的多花；总花梗通常有5-8朵无柄、紧挤的花；苞片披针形，被糙伏毛；小苞片披针形，被伏贴的刚毛；花萼披针形，花紫色、淡紫色或白色，基部具瓣柄，翼瓣蓖状。

细胞分离技术需要应用到分离相溶剂，而现有技术中采用液态分离相的溶剂来促进细胞分离效果还不是很好，因而仍需进一步改善处理。

发明内容

本发明的目的在于提供一种多种溶剂液态分离相的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种多种溶剂液态分离相的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，溶剂基体的制备：将15-25份的二亚苄基山梨醇加入到50-60份的乙醇溶剂中，然后以100-200r/min的低转速进行搅拌20-30min，随后再加入5-10份的改性的纳米二氧化硅，继续以300-500r/min的转速进行搅拌15-25min，搅拌结束，再加入4-10份的聚乙二醇，继续搅拌20-30min，得到溶剂基体；

步骤二，固态助剂的制备：将琼脂糖、琼脂、明胶先加入到黑枸杞提取剂中进行超声分散20-30min，超声功率为100-200W，随后再加入葡萄糖溶液，继续以120-140r/min的转速搅拌20-30min，搅拌结束，得到固态助剂；

步骤三，分离助剂的制备：将醋酸钾与十二烷基硫酸钠按照重量比1:2加入到反应瓶中，采用超声振荡的方法处理10-20min，得到分离助剂；

步骤四，多溶剂液态分离相的制备：将步骤一制备的溶剂基体、步骤二制备的固态助剂、步骤三制备的分离助剂依次加入到搅拌器中进行搅拌，搅拌转速为100-200r/min，搅拌10-20min，然后再升至500-700r/min的转速继续搅拌20-30min，得到多溶剂液态分离相。

优选地，所述改性的纳米二氧化硅的改性方法为：将纳米二氧化硅在采用高温活化，然后再采用等离子辐照处理，辐照结束，再置于分散剂中超声分散10-20min，超声功率为300-400W，超声结束，离子、干燥，即可。

优选地，所述高温活化的温度为700-1000℃，高温时间为45-55min。

优选地，所述高温活化的温度为850℃，高温时间为50min。

优选地，所述等离子辐照处理的功率为500-1000W，辐照时间为10-20min。

优选地，所述等离子辐照处理的功率为750W，辐照时间为15min。

优选地，所述分散剂的制备方法为将柠檬酸钠加入到稀土氯化镧溶液中进行搅拌20-30min，搅拌转速为500-900r/min，然后再加入磷酸调节pH至5.0-6.0，即可。